Гепатит B: как понять, что я болен, если он проходит бессимптомно?

Теория и практика / Диагностика и лечение Анализ на вирусные гепатиты сегодня не просто скрининг – его требуют сдать перед любой операцией, и даже гастроскопией. И иногда результат неожиданно положительный. К счастью, это не всегда означает, что вы больны.

На сегодняшний день известно около десятка различных вариантов вируса, поражающего печень.  Самые распространенные из них – это гепатиты В и С. Опасность заключается в способности болезни переходить в хроническую форму. Для вируса типа В эта вероятность составляет около 15%, для С – которому врачи дали прозвище «ласковый убийца», более 85%.  А еще эти инфекции очень часто протекают стерто.  Заразившись, человек либо совсем не ощущает симптомов, либо чувствует общее недомогание, которое списывает на хроническую усталость или подхваченное ОРВИ. Тем временем вирус ведет свою разрушительную работу. К счастью, вирусы за редким исключением не передаются контактно-бытовым путем (это не относится к случаям, когда два человека пользуются одной бритвой или зубной щеткой), основные пути передачи – половой и парентеральный (через кровь).

Гепатит В намного заразнее гепатита С – для заражения достаточно одного незащищенного полового акта или использования после больного маникюрных ножниц.

Что же делать, если результат анализа положительный? Первое – не паниковать: не менее чем в 5% случаев к слову «положительный» можно добавить приставку «ложно».  Несмотря на высокую чувствительность и специфичность теста, он основан на анализе иммунитета, а это слишком нестабильная материя.  Причиной ложноположительного результата может оказаться целый ряд факторов, среди которых беременность, аутоиммунные заболевания, недавний прием, влияющих на иммунитет, лекарств, и даже ОРВИ с поражением верхних дыхательных путей или недавняя вакцинация от гриппа или столбняка.  По правилам, получив положительный результат на гепатит В или С, лаборатория должна сделать контрольный анализ или провести ПЦР-диагностику, но, к сожалению, так происходит не всегда. Да и повторный анализ того же самого образца крови может вновь оказаться ложноположительным. Поэтому, если не была проведена ПЦР-диагностика, врачи рекомендуют пересдать анализ через 1-2 недели в другой лаборатории.

Важно отметить, что прежде всего речь идет о скрининговых маркерах гепатитов: для гепатита B- это HbsAg, а для гепатита С AntiHCV.

Наша справка

Скрининговый маркер гепатита B – HbsAg, или, как его еще называют, австралийский антиген. Это самый ранний показатель болезни, он появляется в крови еще до повышения уровня печеночных ферментов. У здорового человека в крови он не определяется. Положительный результат свидетельствует о остром гепатите В, хроническом гепатите В или носительстве вируса.

AntiHCV. это основной скрининговый показатель гепатита С. Появляется в крови через 4-6 недель после заражения и в дальнейшем выявляется постоянно. Выявление положительного маркера говорит о том, что человек был инфицирован вирусом гепатита С и либо излечился от него, что бывает примерно в 15% от всех случаев заражения, либо является больным острой или хронической формой заболевания.

Если эти анализы окажутся положительными, врач инфекционист или гепатолог назначит ряд уточняющих анализов, которые расскажут о стадии гепатита, его активности, генотипе вируса и других особенностях заболевания.

Уточняющие анализы при гепатите В

HBeAg – показатель активной репликации (размножения) вируса в организме. Этот маркер свидетельствует от высокой активности вируса, что может быть как при острой, так и при хронической форме. Если активность низкая, выдается ответ отрицательно. Положительный HBeAg в сочетании с высокими показателями печеночных ферментов — одно из показаний к началу антивирусной терапии.

AntiHBctotal— антитела могут свидетельствовать о текущем, либо о перенесенном гепатите В. Это один из маркеров, указывающий на перенесенный в прошлом гепатит В, который не перешел в хроническую форму, то есть произошло излечение от заболевания.

AntiHBcIgM – маркер острого гепатита. Появляется в крови при активном остром гепатите, а также если «проснулся» длительно существовавший, неактивный хронический гепатит. Через 6 месяцев после завершения острого процесса этот маркер исчезает из крови. Часто этот маркер используют для наблюдения за неактивным хроническим гепатитом В и за носителями, чтобы не пропустить возможное обострение.

AntiHBe– это маркер становится положительным, когда активность вируса гепатита В значительно снижается, то есть это у больных острой формой его обнаружение чаще всего свидетельствует о начавшемся выздоровлении. Также важен для контроля эффективности лечения.

AntiHBsAb – показатель наличия иммунитета к гепатиту В. У людей, которые в своей жизни не встречались в вирусом гепатита В этот показатель близок к нулю. Если человек перенес гепатит В и излечился, формируется иммунитет, проявлением которого является повышение уровня антител (от 1000 до 10000 Ед/л и более).  Также уровень антител повышается после вакцинации, в дальнейшем анализ сдают для оценки напряженности иммунитета и расчета сроков повторной вакцинации (см. табл.).

Anti-HBS Ед/л

Рекомендуемый срок вакцинации

Менее 10

немедленно

11-100

Через 3-6 месяцев

100-1000

Через 1 год

1000-10000

Через 3,5 года

Более 10000

Через 7 лет

Качественное определение вируса ДНК (HBVDNA кач.)  — это самый ранний показатель заражения вирусом гепатита В – показатель можно использовать для скрининга в группах риска (например, если был контакт с кровью или незащищенный половой акт с больным вирусным исследований.

Количественно определение вируса ДНК (HBVDNA колич.)  — этот показатель дает точную цифру – сколько вируса в данный момент находится в крови, то есть показывает так называемую вирусную нагрузку. Используется для определения степени активности процесса, выявления показаний к началу антиретровирусной терапии и оценки эффективности лечения.

Уточняющие анализы при гепатите С

Качественное определение РНК вируса гепатита С (HCVRNA кач.)По аналогии ПЦР –диагностикой гепатита В этот анализ дает точный ответ, есть ли вирус в организме человека. Точность этого теста превышает 98%. А еще это самый ранний анализ на возможное заражение –РНК вируса можно выявить в крови уже 10 дней после предполагаемого заражения.

Вопреки расхожему мнению, гепатит С практически не передается половым путем – риск составляет от 2,5 до 5 процентов.

Количественное определение РНК вируса гепатита С (HCVRNA колич.) как и в случае с гепатитом В, определяет степень вирусной нагрузки. Применяется для выявления показаний к началу терапии и контроля эффективности лечения. Также позволяет определить, какой из нескольких типов вируса вызвал заболевание. От генотипа зависит прогноз заболевания (есть более «злые» и более «мягкие» вирусы) и схема лечения.

В любом случае, помните — положительный маркер не гепатит может оказаться ложным, а может указывает лишь на то, что вы когда-то перенесли стертую форму заболевания, но иммунитет справился и произошло самоизлечение. Не спешите паниковать, не прочитав эту статью и не пройдя консультацию инфекциониста, специализирующегося на вирусных гепатитах.

Автор: Алексей Федоров Опубликовано: 27 сентября 2017 г. Журнал «Здоровье»№9 2017 Журнальный заголовок: «По следу вируса»  Войти | Регистрация * Авторизация

Вы можете авторизоваться на сайте при помощи:

Забыли пароль?    Регистрация Регистрация

Введите e-mail адрес, указанный при регистрации

Регистрация

Зарегистрировавшись, вы сможете:

  • комментировать статьи и блоги,
  • бесплатно получать онлайн-консультации у специалистов,
  • пользоваться сервисами,
  • участвовать в конкурсах,
  • общаться на форуме.

Последние комментарии

Kr_80@mail.ru [3 дня назад] Предупреждён — значит вооружён! Спасибо за статью! Queeny [17 дней назад] Очень полезная статья. Давно что-то подобное искала! Jade17 [26 дней назад] вы правы!

Еще в рубрике

«Мы живем в мире, где худое тело имеет высокую ценность»

Наш гость: Светлана Бронникова, психотерапевт…

Как защитить глаза от влияния компьютера

Каждый второй россиянин имеет проблемы со зрением…

ЭКО: что влияет на здоровье ребенка?

По статистике, женщины в возрасте 45-49 лет сейчас…

5 факторов, влияющих на сон

Зимой с утра мы часто выглядим как сонные мухи, а…

Вспомогательные элементы

Организм беременной женщины перестраивается на…

В помощь пищеварению

Бывает, что даже самая полезная еда падает в желудок…

Чем дольше человек курит, чем больше сигарет выкуривает, тем выше частота рака

Михаил Кропотов, профессор, доктор медицинских наук…

УШЁЛ, НО ОСТАВИЛ СЛЕД

Многие из нас переболели COVID-19. К несчастью…

Теория и практика Лекарства Диагностика и лечение Психический комфорт Инновации Первая помощь Красота Ежедневный уход Салонные процедуры Эстетическая медицина Движение Фитнес Восточные практики Антиэйдж Антивозрастная медицина Секреты долголетия 50+ Еда Здоровое питание Диеты Витамины и добавки Рецепты Эко-жизнь Среда обитания Путешествия Семья Мужской вопрос Тет-а-тет Женское здоровье Дети Люди и истории Секреты селебрити Экспертное мнение Личный опыт

Адрес редакции и издателя: 127015, ГСП-4, г. Москва, Бумажный проезд, 14, стр. 1 Тел. (499)257-41-56 Е-mail: zdorovie@zdr.ru Карта проезда

Реклама на сайте и в журнале

Об ИД Здоровье Распространителям Вакансии Контакты Карта сайта

Наш портал о здоровье, сохранении молодости и здоровом образе жизни. Новости медицины, косметологии, здорового питания от редакции общеизвестного бренда — журнала «Здоровье». У нас вы найдете статьи и блоги о новинках красоты, о диетах, о фитнесе, об уходе за лицом и телом, об anti-age. Вы можете проконсультироваться у специалистов онлайн или найти ответ в нашем проекте «Энциклопедия Здоровья». Электронное периодическое издание «Здоровье» зарегистрировано в Федеральной службе по надзору за соблюдением законодательства в сфере массовых коммуникаций и охране культурного наследия 25 августа 2006 г. Свидетельство о регистрации Эл № ФС77-25469

Заявление об ответственности. Ответственность за содержание рекламных объявлений, в том числе баннеров, размещенных на веб-сайте, несет рекламодатель. Правила использования материалов Любое использование материалов допускается только при соблюдении правил и при наличии гиперссылки на zdr.ru

Консультация инфекциониста / Алексей, Екатеринбург 2782 просмотра 12 июля 2019

На сервисе СпросиВрача доступна консультация инфекциониста по любой волнующей Вас проблеме. Врачи-эксперты оказывают консультации круглосуточно и бесплатно. Задайте свой вопрос и получите ответ сразу же!

Ответы врачей Пожаловаться Галина Корчагина, 12 июля 2019 Уролог, Андролог Здравствуйте! Прикрепите результаты исследований. Пожаловаться Алексей, 12 июля 2019 Клиент Галина, здравствуйте прикрепил их в виде фотографий, также их загрузил на гугл диск https://drive.google.com/open?id=1CabCuAtspHcTo9QgmROMQcXxEix8Xsmp Пожаловаться Елена Фурманова, 12 июля 2019 Педиатр Здравствуйте это все что на гепатит сдавали? Пожаловаться Алексей, 12 июля 2019 Клиент Пожаловаться Кирилл Шаповалов, 12 июля 2019 Инфекционист у Вас хронический вирусный гепатит В с минимальной биохимической активностью. Вам нужно стать на учет в кабинет инфекционных заболеваний по месту жительства. Конечно, привитых людей у которых выработался иммунитет Вы заразить не можете, тех у кого нет иммунитета к гепатиту В можете. Пока стопроцентного препарата для излечения гепатита В нет, но можно значительно снизить вирусную нагрузку. Пожаловаться Алексей, 12 июля 2019 Клиент Кирилл, а то что я прививался в 2006 году — это получается мне не помогло? Или срок действия прививки до 10 лет? Пожаловаться Нина Извозчикова, 12 июля 2019 Инфекционист Здравствуйте!У Вас выявлен вирус гепатита В в крови.Количество вируса не большое.Биохимический анализ в норме.Для уточнения состояния и активности процесса,необходимо сдать анализ крови на антитела по классам и антигенам вируса гепатита В,сдать кровь на протромбин и Д димеры.Сделать УЗИ органов брюшной полости.Со всемирезультатами обратиться к инфекционисту.У Вас присутствует вирус гепатита В,поэтому всем в Вашей семье надо привиться от гепатита В,сексом заниматься в презервативе.При обращении в медицинские учреждения Вы должны предупреждать о наличии у Вас вируса гепатита В Пожаловаться Татьяна Авдеева, 12 июля 2019 Гинеколог, Инфекционист, Педиатр Здравствуйте. У вас хронический вирусный гепатит В с минимальной активностью. Семье сейчас нужно привиться и вам сделать УЗИ ОБП и встать на учет Пожаловаться Евгений Зайцев, 12 июля 2019 Врач КДЛ Добрый день! Гепатит В лечиться и впадает в ремиссию, семью провакцинировать, то все безопасно, с женой сексом заниматься можно после вакцинации. Пожаловаться Елена Фурманова, 12 июля 2019 Педиатр Пожаловаться Руслан Джукаев, 12 июля 2019 Инфекционист Пожаловаться Павел Александров, 12 июля 2019 Инфекционист, Гепатолог Здравствуйте! Малоактивный вирусный гепатит В. Сдалайте Фиброскан, все маркеры гепатита В и Д. Пожаловаться Кирилл Шаповалов, 12 июля 2019 Инфекционист вероятно иммунитет не сформировался, либо Вы уже были больны Пожаловаться Ольга Торозова, 12 июля 2019 Гастроэнтеролог, Терапевт, Диетолог Добрый день. У вас хронический вирусный гепатит В с минимальной активностью. Биохимические пробы в норме, поэтому активного лечения сейчас, скорее всего, не требуется. Обращайтесь в центр лечения гепатитов или к вашему инфекционисту. Членов семьи привить от гепатита В. Стараться не использовать гигиенические предметы одновременно (зубная щетка, бритва и так далее). Через посуду и полотенце не передается. Желательно вести здоровый образ жизни, ограничить или исключить алкоголь. Похожие вопросы по теме Anti-HbsAg 757.0 мМЕмл (ИФА), ПЦР ДНК вируса геп. В не обнаружено. Прививка от гепатита б в 2005 г 2 ответа 2 мая 2017 Нина, Екатеринбург Вопрос закрыт Гепатит Б 1 ответ 2 ноября 2020 Алина Вопрос закрыт Здравствуйте. 7 ответов 29 декабря 2020 [email protected] Вопрос закрыт Что делать, если я не нашел ответ на свой вопрос?

Если у Вас похожий или аналогичный вопрос, но Вы не нашли на него ответ — получите свою бесплатную онлайн консультацию врача.

Если Вы хотите получить более подробную консультацию врача и решить проблему быстро и индивидуально — задайте платный вопрос в приватном личном сообщении. Будьте здоровы!

Хронический гепатит В+D (ХГD) — воспалительное заболевание печени, вызываемое совместно вирусом гепатита В(ВГВ) и D(ВГD), протекающее не менее 6 месяцев и в 70-80% случаев без лечения приводящее к циррозу печени. Частота развития рака печени у больных ХГВ+D составляет 5-6%. Инфицирование ВГD возможно только в присутствии ВГВ, либо одновременно, либо ВГD накладывается на уже имеющуюся ВГВ-инфекцию. Около 3-6% инфицированных ВГВ инфицированы еще и ВГD.

Заражение вирусами происходит так же как и при ХГС путем попадания вирусов в организм здорового человека с инфицированной кровью через кожу или слизистые оболочки посредством медицинского или другого (маникюр, тату и пр.) инструментария. Заражение возможно в быту (бритвенные принадлежности, ножницы). Для ХГВ+D, как и для ХГВ, передача вируса половым путем, а так же от матери плоду, имеет большее значение, чем при ХГС.

В чем заключаются основные проблемы диагностики и лечения ХГВ+D:

Эффективное лечение ВГВ+D — одна из нерешенных проблем в современной гепатологии! NB! В настоящее время ведутся клинические исследования, в том числе в ООО «Гепатолог» , по созданию новых препаратов для лечения ХГВ+D.

Что это за анализ? Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

На данный момент Реакция Вассермана считается устаревшей, и с 2006 года для диагностики сифилиса почти не применяется. Ее заменили более чувствительные и современные анализы. Однако на бланках до сих пор выводят неизменное «RW». Подпись «RW » — это дань традиции, маленькое негласное правило среди врачей: оставляя старую подпись, сейчас имеют в виду новые современные анализы на сифилис.

Какой биоматериал можно использовать для исследования? Венозную кровь

Treponema pallidum (бледная трепонема) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение.

Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Сифилис относят к классическим заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). Возбудитель – бледная трепонема (Treponema pallidum). Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов

Симптомы сифилиса

 Симптомы сифилиса очень разнообразны. Они меняются в зависимости от стадии заболевания. Выделяют три стадии сифилиса:

Первичный сифилис возникает после окончания инкубационного периода. В месте проникновения возбудителя в организм (половые органы, слизистая рта или прямой кишки) возникает безболезненная язва с плотным основанием (твердый шанкр). Через 1-2 нед после возникновения язвы увеличиваются ближайшие лимфатические узлы (при локализации язвы во рту увеличиваются подчелюстные, при поражении половых органов – паховые). Язва (твердый шанкр) самостоятельно заживает в течение 3-6 нед. после возникновения.

Вторичный сифилис начинается через 4-10 нед после появления язвы (2-4 мес. после заражения). Он характеризуется симметричной бледной сыпью по всему телу, включая ладони и подошвы. Возникновение сыпи нередко сопровождается головной болью, недомоганием, повышением температуры тела (как при гриппе). Увеличиваются лимфатические узлы по всему телу. Вторичный сифилис протекает в виде чередования обострений и ремиссий (бессимптомных периодов). При этом возможно выпадение волос на голове, а также появление разрастаний телесного цвета на половых органах и в области заднего прохода (широкие кондиломы).

Третичный сифилис возникает в отсутствие лечения через много лет после заражения. При этом поражается нервная система (включая головной и спинной мозг), кости и внутренние органы (включая сердце, печень и т. д.).

При заражении во время беременности у ребенка возможен врожденный сифилис.

Осложнения сифилиса

По результатам научных исследований, в отсутствие лечения примерно у трети больных развивается третичный сифилис. Примерно четверть больных из-за него погибает. Врожденный сифилис может приводить к тяжелым поражениям или смерти ребенка.

Лечение сифилиса

Достаточно сложное и требует дальнейшего длительного наблюдения. Стоит отметить, что лечение сифилиса на ранних стадиях не представляет особенной сложности с точки зрения выбора препаратов. Особенность бледной трепонемы заключается в том, что она все еще сохраняет чувствительность к пенициллину, который является препаратом выбора при сифилисе.

В случае аллергии на пенициллин назначают антибиотики из ряда макролидов (эритромицин,кларитромицин) или цефалоспоринов (цефтриаксон и тд). Препараты назначаются внутримышечно или в таблетках. Лечение активных форм заболевания проходит в стационарных условиях, пациенты с латентной формой могут получать амбулаторную терапию. Длительность лечения зависит от стадии заболевания и может занимать от нескольких недель до нескольких лет.

Антитела к возбудителю сифилиса

 Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG. В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени. Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum. После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более. От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Зачем проводится анализ?

Повышение и понижение показателей

Для диагностики сифилиса. Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование? При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле. Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи. При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его. Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом). Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Результаты/Норма/Расшифровка анализа

Референсные значения (значения в норме)

Результат: отрицательно. Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Положительный результат у ранее серонегативного пациента, а также значительный прирост титров в парных сыворотках, взятых с интервалом 7 дней, говорит о первичной инфекции. Обнаружение антител к трепонеме в крови новорождённого помогает подтвердить диагноз «врождённый сифилис». Кроме того, причиной положительного результата может быть третичный или скрытый сифилис.

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Подготовка к сдаче анализа

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови

Что может повлиять на результат анализа?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности. И многие другие соматические заболевания.

 Важные замечания

  • Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
  • Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
  • Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
  • При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.

• Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.

Шапилова Н.В.

О.А. Тарасенко,  И.А. Гукасян,  Л.В.Соболевская,  Т.В. Черненко

 

Станция переливания крови Департамента Здравоохранения г. Москвы

В настоящее время исследование образцов донорской крови на маркеры вирусных гепатитов В (ВГВ) и С (ВГС) проводят серологическими методами: иммуноферментным (ИФА) или иммунохемилюминисцентным  (ИХЛА) анализом, позволяющими определять  наличие  в   них поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) и антител к белкам ВГС (анти HCV). Введение в лабораторную практику службы крови обязательного тестирования донорской крови на указанные серологические маркеры ВГВ и ВГС  позволило  значительно  снизить риск посттрансфузионной  передачи ВГС и ВГВ.

Известно, однако, что при ВГС специфические антитела появляются в среднем через 10-12 недель от момента заражения, а в некоторых случаях сроки их появления могут отодвигаться до 30-50 недель [2,6]. Поэтому при исследовании методами ИФА или ИХЛА образцов крови, взятой от донора с ранней стадией ВГС, когда антитела еще не выявляются (период, так называемого, серонегативного окна), получают, как правило, ложноотрицательный результат. В то же время именно в этот период ВГС наблюдается, выраженная виремия  и связанная с ней высокая « инфекционная способность» инфицированной крови [3 ]. В связи с этим компоненты крови, заготовленные от донора, находящегося в периоде «серонегативного окна», являются основным источником заражения реципиента ВГС при гемотрансфузии.

Использование NAT-технологий, в частности метода ПЦР, позволяет выявить РНК HCV в крови уже через 1-2 недели после заражения, т.е. приблизительно за 60 дней до выявления в ней антител к HCV серологическими тестами.

HBsAg в большинстве случаев является наиболее значимым серологическим маркером острого и хронического ВГВ, выявление которого в крови свидетельствует с высокой степенью вероятности о присутствии в ней вируса . Однако, зарегистрированы случаи заражения ВГВ при переливании HBsAg-негативной крови. В настоящее время известно о существовании по крайней мере двух «ускользающих (escape)» мутантов HBsAg [9,13], которые могут возникать как естественным путем в ходе инфекционного процесса, так и после противовирусной терапии. Эти штаммы HBV способны передаваться горизонтальным путем и обусловливать ложно негативный результат при скрининге донорской крови на HBsAg. Описана, так называемая, «молчащая» форма ВГВ, характеризующаяся наличием низких концентраций вируса в крови при не детектируемом уровне HBsAg [2, 11]. Она может наблюдаться у некоторых больных после острого ВГВ с самостоятельным разрешением и даже после успешно проведенного противовирусного лечения, а также при хроническом ВГВ. Установлено, что «молчащая» инфекция представляет клиническую форму ВГВ, способную передаваться через компоненты крови, а диагностика ее основывается на тщательном сборе анамнеза и применении высокочувствительного метода ПЦР для определения вирусной ДНК [1].

Задачей настоящей работы было оценить целесообразность использования метода ПЦР для скрининга донорской крови на маркеры ВГС ВГВ.

Пробы крови от каждого донора забирали в 2 пробирки: одну пробирку с разделительным  гелем для получения сыворотки для серологических исследований и вторую пробирку с ЭДТА для получения плазмы для ПЦР.

Скрининг донорских сывороток на серологические маркеры ВИЧ 1,2, ВГВ и ВГС проводили методом ИФА на аппарате Evolis (компания Biorad, США) или методом ИХЛА на аппарате Architect (компания Abott, США).

Для определения антител к HCV методами ИФА и ИХЛА использовали, соответственно, тест-системы Murex anti HCV (Abbott, США) и    тест-системы Architect anti HCV (компания Abbott, США).

Для выявления HBsAg методом ИФА использовали тест-системы Monolisa HBsAg Ultra  (Bio-Rad, США) и тест-системы Architect HBsAg (компания Abbott, США).

Образцы, показавшие при первичном исследовании в ИФА или ИХЛА положительный результат на анти ВИЧ 1,2, анти HCV или HBsAg, отбирали для повторного исследования в тех же тест-системах и подтверждающих тестах.

Все серонегативные образцы исследовали методом ПЦР на наличие РНК HIV, HCV и ДНК HBV.

В течение 2008 года ПЦР-исследования проводили на аппаратах Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor ( компания Roch, Швейцария) с использованием тест-систем: Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor HIV 1 Monitor Test , Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor HCV Test и Cobas Amplicor HBV Monitor Test.

С января 2009 года исследования выполняли методом ПЦР в режиме реального времени на инструментальном комплексе Cobas 201 (Roche. Швейцария), включающем пипетирующую рабочую станцию, аппарат для автоматического выделения нуклеиновых кислот Cobas Ampliprep и анализатор Cobas Taqman для автоматического проведения амплификации и детектирования нуклеиновых кислот с использованием 5 нуклеазной технологии. Многоканальные оптические системы прибора позволяют регистрировать флуоресцентный сигнал от исследуемого образца в каждом цикле ПЦР. Для ПЦР-анализа серонегативных образцов использовали мультиплексные тест-системы CobasTaqScreen MPX Test, разработанные компанией Roche специально для скрининга донорской крови [10]. За счет включения в реакционную смесь различных пар специфических праймеров и зондов эти системы позволяют выявлять одновременно в одной пробирке РНК HIV-1 rpyппы М и группы О, HIV-2, HCV и ДНК HBV. Образцы, при исследовании которых регистрировали нарастание флуоресцентного сигнала, считали положительными, т.е. содержащими вирусную РНК (ДНК). Такие образцы исследовали повторно в той же тест-системе. При получении повторно положительного результата проводили идентификацию выявленной нуклеиновой кислоты с помощью указанных выше ПЦР-диагностикумов на отдельные инфекции.

Результаты исследования представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1 — Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом   ПЦР на комплексе Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor           

Количество исследований

Количество образцов, содержащих:

PHKHCV

РНК HIV

ДНК HBV

56 983

8

Таблица 2 — Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом  ПЦР на комплексе Cobas S 201                    

Количество исследований

Количество положительных результатов     в тесте МРХ

Количество положительных результатов в дискриминаторном тесте на:

РНК HCV

РНК HIV

ДНК HBV

62 438

31

16

4

При исследовании 56983 серонегативных образцов донорской плазмы на наличие вирусной РНК (ДНК) на аппаратах Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor с помощью диагностических тест-систем на отдельные иифекции (табл.1) было выявлено 8 образцов, содержащих РНК HCV. При этом РНК HIV-1 и ДНК HBV ни в одном из исследованных образцов выявлено не было.

При исследовании 62438 серонегативных образцов на аппаратном комплексе Cobas 201 с помощью тест-систем CobasTagScreen МРХ в 31 случае было зарегистрировано нарастание флуоресцентного сигнала, свидетельствующее о наличии в образце вирусной РНК (ДНК) (табл.2). Дискриминаторный анализ этих образцов с помощью тест- систем на отдельные инфекции  выявил в 16-и из них РНК HCV, в 4-х. других- ДНК HBV   в низкой концентрации (менее 60 IU./ml). Остальные 11 образцов, положительные в тесте CobasTagScreen МРХ, показали отрицательный результат в индивидуальных тестах на РНК HIV-1, РНК HCV и ДНК HBV. Однако при исследовании образцов, содержащих ДНК HBV и образцов с не идентифицированной нуклеиновой кислотой на наличие антиНВсоr во всех случаях выявили выраженную серологическую реакцию (коэффициент позитивности колебался от 7,8 до 8,6) (табл.3).

Таблица 3 — Выявление ДНК HBV у серонегативных доноров

№ п/п

Результат скринингового теста

Результат ПЦР-теста на ДНК HBV

Наличие Anti НВсог

Наличие Anti HBs

1

+

+

2

+

+

+

3

+

+

4

+

+

+

5

+

+

+

6

+

+

  

7

+

+

8

+

+

+

9

+

+

+

10

+

+

11

+

+

+

_

12

+

+

+

13

+

+

14

+

+

+

15

+

В 4-х образцах были также обнаружены антитела к HBsAg . Наличие в образцах с не идентифицированной нуклеиновой кислотой серологических маркеров HBV инфекции позволяет считать, что в них присутствует ДНК HBV в концентрации ниже предела чувствительности теста Cobas Amplicor HBV Monitor (40 IU/ml), выявляемая, однако, более чувствительной тест-системой CobasTagScreen MPX (3,3-4,4 IU/ml).

Обобщая полученные результаты, мы установили, что методом ПЦР из 119421 образцов донорской плазмы, показавших отрицательный результат в серологических тестах, выявлено 24 образца (0,02%), содержащих РНК HCV.  16 HCV -позитивных образцов имели нормальный уровень трансаминаз, в то время как в 8-и других был зарегистрирован повышенный уровень активности АЛТ. Подобная картина может наблюдаться как  при ранней инфекции (период серонегативного окна), так и при хроническом ВГС у лиц с подавленным иммунитетом. Данные литературы, свидетельствующие об отсутствии прямой зависимости между уровнем АЛТ и наличием РНК HCV в сыворотке крови [4] позволяют считать, что обнаружение РНК HCV в крови является наиболее информативным показателем HCV-инфекции в период серонегативного окна.

Также нами было выявлено 11 случаев ВГВ у HBsAg негативных доноров. В 4-х из них низкий уровень виремии сохранялся несмотря на наличие анти- HBS. Известно, что подобное состояние иногда может наблюдаться длительное время после клинического выздоровления от острого ВГВ. Предполагают, что персистенция вируса в этом: случае может осуществляться в форме иммунного комплекса с анти-HBs [11]. В остальных случаях сочетание низкого уровня виремии с наличием только анти-НВсог скорее укладывается в картину «молчащей» формы хронического ГВ. Считают, что отрицательные результаты при детекции HBsAg у больных ВГВ могут быть вызваны низким уровнем HBsAg, образованием иммунных комплексов, а также мутациями вируса в S-регионе [11,17]. Механизмы, поддерживающие низкий уровень репликации вируса при «молчащей» форме ГВ нуждаются в дальнейшем изучении. В настоящее время к факторам, способным поддерживать персистенцию вируса в крови при «молчащей» HBV- инфекции относят инфицирование вирусом моноцитов крови, формирование иммунных комплексов с антителами, ослабленный иммунитет и коинфекцию [11,17].

Таким образом, на основании полученных результатов можно заключить, что скрининг образцов донорской крови с применением ПЦР-тестирования для выявления вирусной РНК (ДНК) позволит снизить риск посттрансфузионной передачи вирусных гепатитов В и С, за счет выявления инфицированных доноров, находящихся в периоде серонегативного окна и доноров с молчащей формой инфекции. Алгоритм апробации донорской крови, при котором скрининг образцов методом ПЦР проводят одновременно с исследованием их в серологических тестах, позволит не только повысить инфекционную безопасность гемопродукции, но и сократить промежуток времени    от момента забора крови до выдачи ее в лечебные    учреждения,  что особенно  важно    для   сохранения компонентов с ограниченным сроком годности.

ЛИТЕРАТУРА

1.    Амосов А.Д. Гепатит В (издание 2).  Кольцов, 2001.- 128 с.

2.    Голосова Т..В., Никитин И.К. Гемотрансмиссивные инфекции.- М.., 2003.- 191 с.

3.    Карякин А.В., Скоцеляс Е.Д., Терентьева Л.А. Мониторинг безопасности донорского контингента России//Трансфузиология, 2007.- №1-2.- с.21.

4.    Майер К.П. Острый вирусный гепатит С.// В кн.: Гепатит и последствия гепатита. /Пер. с нем.- М.: ГЭОТАР Медицина,. 1999.- с.91-98.

5.    Малышев B.C., Федорова В.Д., Потехин О.Е. Маркеры вирусного                               гепатита В у доноров крови и в группах сравнения // Иммунопатология, аллергология, инфектология.-1999.- №1.- с.103-105.

6.    Рагимов А.А., Дашкова Н.Г. Основы трансфузионной иммунологии. — М., 2004.-280 с.

7.    Allain J.P. Occult hepatitis В virus infection: implication in transfusion. // Vox Sang., 2004, Vol.86, N.2, p.83-91.

8.    Busch M.P., Glynn S.A.. Strainer S.L. et al. A new strategy for estimating risk of transfusion-transmitted viral infections based on rates of detection of resently infected donors.// Transfusion, 2004, vol. 45, p.254-264.

9.    Gutierrez C, Devesa M., Loureiro C.L. et al. Molecular and serological evaluation of surface antigen negative hepatitis В virus infection in blood from Venezuela. // J.Med.Virol., 2004, Vol. 3, N.2 p.200-207.

10. Herman S., Ohhashi Y., Kyger E. et al. Performance characteristics of a new multiplex NAT screening test for HBV, HCV and HIV. The Cobas TagScreen MRX Test on the COBAS S 201 system.// Vox Sang., 2007, Vol.91, Suppl.3:81.

11. Ke-Qin Hu. Occult hepatitis В virus infection and its clinical implications. // Journal of viral hepatitis, 2002, Vol.9, p.243-257.

12. Kleinman SH., Strong DM., Tegtmeier GE. Et.al. Hepatitis В virus (DBV) DNA screening of blood donation in minipools with the Cobas AnipliScreen HBV test. // Transfusion, 2005.VoI.45, p.1247-1257.

13. Levicnik.-Stezinar S. Hepatitis В surface antigen escape mutant in a first blood donor potentially missed by a routine screening assay. // Clin.Lab.< 2004, Vol.50, N.l-2, p.49-51.

14. Minegishi K., Yoshikawa A., Kishimoto S. et al. Superiority of minipool nucleic acid amplifycation technology for hepatitis В virus over chemiluminescence immimoassay for hepatitis В surface antigen screening. Vox Sang., 2003, Vol.84, p.287-291.

15. Roth W.K., Weber M., Petersen D. et al. NAT for HBV and anti HBc testing increase blood safety. // Transition, 2002, Vol.42, p.869-875.

16. Stramer S.L., Glynn S.A., Kleinman S.H. et al. Detection of HTV-1 and HCV infections among antibody-negative blood donors by nucleic acid- amplification testing.// N Engl Med, 2004, vol.351, p.760-768.

17. Weber В., Melchior W., Gehrke R. et al. Hepatitis В virus markers in anti-ITBc only positive individuals. III. Med. Virol., 2001, Vol.64, N.3, p.312-3 19.

18. Yoshikawa A, Gotanda Y., Itabashi M. et al. Hepatitis В NAT virus-poselive blood donors in the esrly and late stages of HBV infection: analyses of the window period and kmetics of HBV DNA. Vox Sang.,2005, Vol.88, p.77-86.

19. Голосова Т.В., Никитин И.К. Гемотрансмиссивные инфекции. — М.,2003.

Все статьи в разделе «Лабораторная диагностика»

Оцените статью
Рейтинг автора
4,8
Материал подготовила
Татьяна Лапшаева
Нефролог, врач высшей категории, стаж более 20 лет
А как считаете Вы?
Напишите в комментариях, что вы думаете – согласны
ли со статьей или есть что добавить?
Добавить комментарий