Сделано из пуповинной крови: сыворотка и тромбоцитарный гель и их клиническое использование

Содержание

image

Сдавая анализы в любой лаборатории, вы в 99,999% случаях получите результаты с первого раза. Что же должно произойти, чтобы в 0,001% был перезабор?

Вакуумные пробирки — это чудо и магия. Кровь в них поступает сама, сколько нужно и прекрасно переносит транспортировку. В пробирках есть спец.вещества, например, антикоагулянт. Он не дает крови сворачиваться, сохраняют ее «цельной».

Пробирка наполняется точно до метки. Если нет, будет «Неправильное соотношение крови и антикоагулянта», а значит — перезабор.

Цвет крышек пробирок означает, что внутри разные антикоагулянты. Каждая лаборатория настраивает прибор под конкретную пробирку. Перепутали пробирки при заборе – перезабор.

Кровь в пробирке может плохо перемешаться с антикоагулянтом и начать сворачиваться в сгусток. Иногда это видно на глаз. Могут быть небольшие микросгустки, которые увидит только лаборант. Если нужно посчитать клетки крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты), а они спрятались в сгусток? Правильно, перезабор.

Если нужно посмотреть вещества, которые путешествуют по крови, их смотрят в сыворотке. Пробирку с антикоагулянтом крутят на большой скорости. Клетки под тяжестью уходят вниз, а сверху остается сыворотка. В ней смотрят почти всю биохимию, антитела к инфекциям, гормоны и т.д. Если клетки не успели уйти в сгусток и развалились, их содержимое попадает в сыворотку. Это называется гемолиз. Сыворотка может окраситься вплоть до «лаковой крови» — стать красной как лак. Гемолиз может быть небольшим, невидимым, но значимым для конкретного анализа. В этом случае часть анализов может быть выполнена, остальное – перезабор.

Когда разрушаются лейкоциты, а нужно их посчитать, говорят «цитолиз» или «липемия» и… отправляют на перезабор.

После еды всосавшиеся вещества идут сыворотку. Это «хилёз» — высокое содержание жиров. Сыворотка может стать мутной как молоко. Такое бывает при некоторых заболеваниях, но чаще всего, если сдаетесь не натощак. Некоторые показатели нельзя смотреть в хилезной сыворотке – перезабор.

Не пугайтесь, когда видите хилёз, гемолиз, цитолиз и т.д. Это не заболевание, а приглашение на перезабор и бывает он ооочень редко. Вне зависимости от причины, у нас перезабор происходит за наш счёт.

Многие пациенты, измученные упорным течением крапивницы и постоянными обследованиями по этому поводу, находятся в постоянном поиске очереднойВ В«волшебнойВ таблеткиВ». Некоторые из них в Интернете и других источниках рано или поздно наталкиваются на незнакомое слово – «аутосеротерапияВ».

В 

Так что же такое аутосеротерапия?

Начну издалека. Крапивница – одно из самых распространенных заболеваний кожи. В большинстве случаев причину хронической крапивницы установить не удается, даже при самом тщательном обследовании, что снижает эффективность лечения. Стойкие клинические симптомы крапивницы хоть и не представляют угрозы для жизни пациента, но заметно ухудшают их качество жизни.

В 

Исследования последних лет свидетельствуют о том, что у 30-40% больных крапивница обусловлена аутоиммунными нарушениями, а именно образованием IgG-аутоантител, направленных против IgE или рецепторов к IgE (Fce R1), в результате чего активизируются тучные клетки с выбросом биологически активных веществ, которые ответственны за проявления крапивницы.

В 

Лечение хронической крапивницы – эффективность аутологичной сыворотки

В некоторых исследованиях, в том числе зарубежных, показана высокая эффективность и безопасность применения аутологичной сыворотки (В«аутосеротерапияВ») при лечении различных вариантов хронической крапивницы (аутоиммунной, холодовой крапивницы и фотосенсибилизации). Но не могу не сказать о следующем. В настоящее время все лечебно-диагностические рекомендации основаны на принципах доказательной медицины. Исследований доказательности класса А (прим. 1) по аутосеротерапии, подтверждающих клиническую эффективность этого метода лечения при крапивнице, пока нет.

Примечание 1: Доказательность считается наивысшей (класс А) при наличии данных большого количества рандомизированных клинических исследований, средней (класс В) при ограниченном количестве рандомизированных исследований, нерандомизированных исследованиях или данных журналов наблюдений. Низший класс (С) относился к рекомендациям, основанием для которых служило мнение экспертов.

Итак, аутологичная сыворотка (В«аутосывороткаВ») представляет собой препарат, изготовленный из собственной крови больного специальным образом, в стерильных условиях (прим. 2) и хранится в персонифицированных флаконах.

Примечание 2: Особенности приготовления и хранения препарата позволяют не многим учреждениям проводить лечение аутологичной сывороткой. В Красноярске данный метод применяется всего в нескольких медицинских учреждениях.

Предполагают, что механизм действия аутологичной сыворотки основан на блокировании аутоантител (IgG1, IgG3, IgG4) к альфа-цепи высокоаффинных рецепторов IgE (FceRI) и аутоантител к IgE.

В 

Как вводится сыворотка

Вводится аутологичная сыворотка подкожно по индивидуальным схемам, когда кратность введения и вводимая доза зависят от индивидуальной переносимости препарата. Поэтому лечение аутосывороткой правильнее проводить аллергологам.В Кроме того, аутосыворотка применяется для диагностики аутоиммунного варианта хронической крапивницы (тест с аутосывороткой) и активно применяется в офтальмологии, неврологии и др.

imageЗадайтеВ вопрос аллергологу. Онлайн.В Бесплатно.

В  В  В  В  В  В  В  В  В  В  В  В  В  В  В В ЗАДАТЬ ВОПРОС

Использована литература:

Autologous serum therapy in chronic urticaria: old wine in a new bottle / A.K. Bajaj, A. Saraswat, A. Upadhyay at el. //Indian J. Dermatol. Venereol. Leprol. – 2008. – V.74, (2). – P.109-113.

Autologous whole blood injections to patients with chronic urticaria and a positive autologous serum skin test: a placebo-controlled trial / P Staubach, K Onnen, A Vonend at el. // Dermatology. – 2006. – V.212,(2). – P.150-159.

Greaves, M. Chronic urticaria / M.Greaves // J. Allergy Clin. Immunol. – 2000. – V.105, (4). – P.664-672.

Mori, O. Autologous whole blood intramuscular injection as a cure for chronic urticaria: report of a patient in whom intradermal injection of autologous serum continued to cause a weal-and-flare response / O. Mori, T. Hashimoto // Br. J. Dermatol. – 1999. – V.140, (6). – P.1192-1193.

Альбумин (ALB) – белок плазмы крови, который выполняет большое количество важных функций. Он участвует в процессах метаболизма, переносит по организму ряд химических веществ и прочее. Определение уровня этого белка играет важную роль в оценке состояния печени. ALB составляет примерно 60% от общего количества белка.

Биохимический анализ: альбумин

Поддержание оптимального уровня этого белка крайне важно для функционирования организма в целом. От этого зависит объем крови, циркулирующей в организме. Кроме того, белок отвечает за регулирование осмотического давления. Этот показатель меняется под влиянием многих факторов (например, после употребления соленых продуктов). Поэтому его регулирование является очень важным процессом. Альбумин также отвечает за транспортировку и хранение многих биологических соединений и аминокислот. При обследовании состояния здоровья уровень ALB является одним из ключевых показателей.

Кому необходимо сдать анализ

Анализ крови на альбумин используется в комплексе с данными других исследований при диагностике многих заболеваний. Чаще всего анализ назначается при подозрении на патологии почек и печени. Также его результаты используют для оценки состояния здоровья пациентов с онкологическими диагнозами, обширными травмами или ожогами. Тест назначается самостоятельно или в комплексе с другими анализами. Состав необходимого в конкретном случае обследования определяется врачом на основании жалоб пациента, результатов осмотра, анамнеза.

Интерпретация результатов

Недостаток белка в большинстве случаев указывает на патологии почек. Также он может наблюдаться при наличии воспалительного процесса. Снижение показателей во время беременности является нормой. Референсные значения зависят от возраста пациента. Для взрослых норма колеблется в пределах 35-52 г/л. По результатам теста можно судить о степени тяжести ряда заболеваний.

Выводы

Количество ALB требуется для диагностики ряда заболеваний, выбора оптимальной тактики лечения. Оно характеризует обмен веществ, состояние здоровья в целом. При выраженных симптомах проблем с почками данный тест назначается в первую очередь. Также он может проводиться в составе комплексного обследования либо после него, если выявлены отклонения и необходимо уточнить их характер и причину. Интерпретация результатов может выполняться только врачом, для самодиагностики тест не предназначен. В некоторых случаях возможны отклонения от нормы при отсутствии заболеваний.

📜 Инструкция по применению Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека 💊 Состав препарата Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека ✅ Применение препарата Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека 📅 Условия хранения Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека ⏳ Срок годности Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека Описание лекарственного препарата Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека (Antirabies immunoglobulin from human serum) Основано на официально утвержденной инструкции по применению препарата и подготовлено для электронного издания справочника Видаль 2011 года, дата обновления: 2019.11.25

Владелец регистрационного удостоверения:

Sichuan Yuanda Shuyang Pharmaceutical, Co.Ltd (Китай) Код ATX: J06BB05 (Rabies immunoglobulin)

Лекарственная форма

Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека Р-р д/инъекций 150 МЕ/мл: фл. 1 мл, 2 мл или 5 мл 1 шт. рег. №: ЛСР-010494/08 от 24.12.08 — Бессрочно

Форма выпуска, упаковка и состав препарата Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека

Раствор для инъекций прозрачный, слабо опалесцирующий, бесцветный или светло- желтого цвета.

1 мл
иммуноглобулин антирабический 150 МЕ

Вспомогательные вещества: глицин гликокол (стабилизатор) — 20-25 мг, натрия хлорид — 7 мг, вода д/и.

Клинико-фармакологическая группа: Иммунологический препарат. Иммуноглобулин Фармако-терапевтическая группа: МИБП-глобулин

Фармакологическое действие

Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека представляет собой концентрированный раствор очищенной гамма-глобулиновой фракции сыворотки крови человека, выделенной методом холодовой экстракции этанолом и подвергнутой процессу ультрафильтрации, очистки и вирусной инактивации при значении рН 4/0 и температуре 23-25°С в течение 21 дня.

Препарат содержит специфические антитела, способные нейтрализовать вирус бешенства.

Фармакокинетика

Максимальная концентрация антител достигается через 2-3 дня после внутримышечного введения антирабического иммуноглобулина. Период полувыведения антител составляет от 3 до 4 недель.

Показания препарата Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека

  • в комбинации с антирабической вакциной для предупреждения заболевания людей гидрофобией при тяжелых множественных укусах бешеными или подозрительными на бешенство животными.

Повторное назначение: при повторном множественном укусе больным бешенством или подозрительным на бешенство животным антирабический иммуноглобулин не назначается, если при первом укусе пострадавший получил полный комбинированный курс антирабического лечения, а проводится полный курс с назначением только антирабической вакцины.

Открыть список кодов МКБ-10

Код МКБ-10 Показание
Z24.2 Необходимость иммунизации против бешенства
Z29.1 Профилактическая иммунотерапия (введение иммуноглобулина)

Режим дозирования

Немедленно или как можно раньше после укуса или повреждения проводят обязательную местную обработку раны. Раны обильно промывают водой с мылом или любым детергентом и обрабатывают 40-70% спиртом или 5% спиртовым раствором йода. В случаях, когда имеются показания, проводят хирургическую обработку раны.

После местной обработки раны немедленно начинается специфическое лечение. Перед инъекцией проверяют целостность флакона и наличие на нем маркировки. Не пригоден к применению препарат во флаконах с нарушенной целостностью, маркировкой, а также при изменении его физических свойств (цвета, прозрачности и др.), при истекшем сроке годности, при нарушениях режима хранения.

Вскрытие флаконов и процедура введения препарата осуществляются при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Постановка кожной пробы перед введением не требуется.

Препарат вводят как можно в более ранние сроки после обращения однократно в дозе 20 МЕ/кг массы тела взрослого или ребенка.

Пример расчета дозы иммуноглобулина

Масса тела пострадавшего — 60 кг;

Например, фактическая активность иммуноглобулина данной серии, указанная на этикетке флакона или на упаковке, составляет 200 МЕ/мл.

Для того, чтобы определить необходимую для введения дозу иммуноглобулина в мл, нужно вес пострадавшего (60 кг) умножить на 20 ME и разделить полученное число на активность препарата (200 МЕ/мл), т.е. 60×20/200 = 6 мл

Как можно большая часть рассчитанной дозы должна быть инфильтрирована вокруг и в глубь раны, если это возможно анатомически.

Остальная часть должна быть введена внутримышечно:

Взрослым: в верхний наружный квадрант ягодичной мышцы;

Детям: в переднебоковую поверхность бедра.

Для детей (особенно имеющих множественные ранения) доза антирабического иммуноглобулина из сыворотки крови человека может быть разведена в 2-3 раза стерильным 0.9%-ным раствором натрия хлорида до объема, обеспечивающего полноценную инфильтрацию пораженных участков тела. Антирабический иммуноглобулин из сыворотки крови человека вводят не позднее 7 суток после контакта с больным бешенством или подозрительным на бешенство животным.

Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека применяется в комбинации с вакциной антирабической при 3-ей категории повреждения, подробное описание характера контакта с животным, данные о нем, а также схема лечения описаны ниже в таблице:

Схема лечебно-профилактических прививок антирабической вакциной и Иммуноглобулином антирабическим из сыворотки крови человека (АРИГ)

Категория повреждения Характер контакта Данные о животном Лечение
1 Нет повреждений кожных покровов, нет ослюнений кожных покровов, нет ослюнений слизистых оболочек Больное бешенством Не назначается
2 Ослюнения неповрежденных кожных покровов, ссадины, царапины, поверхностные укусы туловища, верхних и нижних конечностей (кроме участков головы, лица, шеи, кисти, пальцев рук и ног), нанесенные домашними и сельскохозяйственными животными Начать лечение немедленно: вакцина по 1.0 мл в 0, 3, 7, 14, 30, 90 день
3 Начать немедленно комбинированное лечение Иммуноглобулином антирабическим из сыворотки крови человека в 0 день и антирабической вакциной по 1.0 мл в 0, 3, 7, 14, 30 и 90 день

Комбинированное лечение Иммуноглобулином антирабическим из сыворотки крови человека и вакциной антирабической должно осуществляться при строгом выполнении следующих условий:

Сначала вводится Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека, и не более чем через 30 минут после него вводится антирабическая вакцина.

Необходимо строго соблюдать последовательность введения антирабических препаратов!

Введение АРИГ после введения антирабической вакцины не допускается.

Иммуноглобулин антирабический и антирабическая вакцина должны вводиться в разные участки тела с использованием различных шприцов.

Дозировка иммуноглобулина не должна превышаться ни при каких обстоятельствах, так как введение повышенной дозы иммуноглобулина может частично подавить продукцию антител.

При необходимости экстренной профилактики столбняка последнюю осуществляют после введения иммуноглобулина антирабического и первой прививки антирабической вакцины.

Побочное действие

У отдельных лиц в первые несколько суток в месте введения препарата возможно развитие гиперемии и отечности, которые не нуждаются в назначении лечения, а также субфебрильная температура. В исключительно редких случаях возможно развитие аллергической реакции немедленного типа (крапивница, отек Квинке, анафилактический шок), в связи с чем, лица, получившие иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека, должны находиться под медицинским наблюдением не менее 30 мин.

Противопоказания к применению

Поскольку иммуноглобулин из сыворотки крови человека применяют по витальным (жизненным) показаниям, противопоказания к его применению отсутствуют.

Лицам с повышенной чувствительностью к препаратам крови человека и беременным иммуноглобулин вводится в условиях стационара.

Особые указания

Запрещается вводить препарат внутривенно.

Не допускается использование препарата в случае наличия осадка, не исчезающего при встряхивании, посторонних образований, трещин на флаконе, не плотно закрытой крышки флакона.

После вскрытия флакона назначенная доза должна быть немедленно использована. Остаток препарата во флаконе не подлежит применению.

Лекарственное взаимодействие

Введение антирабического иммуноглобулина может быть осуществлено одновременно с проведением экстренной профилактики столбняка. Плановое введение других профилактических препаратов допускается не ранее, чем через 3 месяца после завершения курса комбинированного антирабического лечения.

Условия хранения препарата Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека

Хранить и транспортировать при температуре от 2° до 8°С в защищенном от света месте. Не замораживать. Хранить в недоступном для детей месте.

Срок годности препарата Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека

Срок годности — 2 года.

Условия реализации

Для лечебно-профилактических учреждений. Если вы хотите разместить ссылку на описание этого препарата — используйте данный код

X

Диоксид кремния

Сыворотка крови – жидкая часть крови лишенная форменных элементов и некоторых белков (фибрин и др.) в отличие от плазмы, в которой сохраняются все элементы жидкой части крови кроме форменных элементов.

Получение сыворотки крови является результатом двухступенчатого биохимического процесса: свертывания (коагуляции) крови и ретракции (уплотнения) сгустка. Для запуска коагуляционного каскада необходимо наличие внешнего активатора, каковым может служить диоксид кремния, поэтому процесс свертывания крови быстрее происходит в стеклянных пробирках, так как кремния диоксид является базовым материалом стекла или в пластиковых пробирках с активатором свертывания. Активатор свертывания (clot activator) выполнен в виде напыления на внутренней стенке пробирки.

После образования сгустка начинается этап его уплотнения и выделения сыворотки. На практике ретракция сгустка ускоряется центрифугированием пробирок с кровью.

Для получения максимально чистой сыворотки рекомендуется соблюдение трёх условий:

  1. После забора крови в пробирку в соответствии с инструкцией необходимо осторожно однократно перевернуть пробирку для более полного контакта крови с активатором свертывания;
  2. Дождаться завершения процесса свертывания крови в течение 20-30 минут при комнатной температуре и вертикальном положении пробирки;
  3. Центрифугировать пробирку со свернувшейся кровью не менее 10 минут с ускорением 1500 G (примерно 3000 об/мин) для максимального выдавливания сыворотки из сгустка. При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.

После центрифугирования и полной ретракции сгустка сыворотка располагается над сгустком, но в контакте с ним. Сохраняется опасность загрязнения сыворотки составляющими сгустка при неосторожном обращении с пробиркой (встряхивание, опрокидывание и пр.). Для лучшего очищения сыворотки и более полного разграничения сыворотки и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие биологически инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее сыворотки, но легче кровяного сгустка, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером. Стабильность такого барьера гарантирована в течение 5-7 дней при хранении пробирки с кровью при комнатной температуре.

Оптимальные сроки сохранности образца крови в данных пробирках составляет при комнатной температуре 6 часов, при хранении в холодильнике (+4ºС) – 24 часа. Повторное центрифугирование пробирок, особенно с гелем, не допускается.

Полученная сыворотка крови применяется для очень широкого спектра лабораторных биохимических, ИФА и иммунологических исследований:

  • белковый состав,
  • ферменты,
  • гормоны,
  • онкомаркеры,
  • ВИЧ-инфицирование, гепатиты и пр.

Антикоагулянты для получения цельной крови или плазмы

Не все анализы в клинике делаются из сыворотки крови. Для многих видов исследований необходима цельная кровь, содержащая форменные элементы, или плазма, освобожденная от клеток крови центрифугированием.

Для получения несвернувшейся крови разработаны пробирки с определенными добавками — антикоагулянтами. На практике используют два вида антикоагулянтов:

  1. Ингибиторы (вещества, вызывающие торможение) тромбина. Тромбин играет ключевую роль в коагуляционном каскаде. Он принимает участие в формировании факторов свертывания крови и способствует трансформации фибриногена в фибрин. Добавление биохимических ингибиторов тромбина эффективно активирует антикоагуляционные свойства крови.
  2. Связывание (удаление) ионов Ca2+. При прочих равных условиях свертывание крови происходит при активном участии ионов Ca2+. Удаление их является эффективным механизмом сохранения крови в жидком состоянии.

Гепарин 

Гепарин — кислый мукополисахарид с молекулярной массой 4 000–40 000 – является натуральным антикоагулянтом, присутствующем в любом здоровом организме. Гепарин активирует создание комплексных соединений между антитромбином III и такими факторами свертывания крови, как тромбин, факторы XIIa, XIa, Xa, IXa и VIIa. В таком комплексе факторы свертывания необратимо деактивируются.

Для целей получения плазмы крови в пробирки добавляют литиевую либо натриевую соль гепарина в пропорции к забираемой в пробирку кровью 15-20 МЕ/1 мл, что служит гарантией полной инактивации свертывания крови и не искажает исследуемые параметры. Эритроциты сохраняются в образце крови до 8 часов. Нельзя использовать для проведения анализов образец крови, хранившийся более 48 часов даже в условиях холодильника (+4ºС).

Для получения качественного анализа необходимо немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и гепарина. Плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1 000–1 500 G (2 000–3 000 оборотов/минуту). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4 000 G c крышечкой и до 12 000 G без крышечки.

В клинике пробирки с гепарином применяются, в основном для проведения исследования электролитного состава крови, газового состава крови и содержания алкоголя в крови.

Не рекомендуется использовать гепарин для:

  • морфологических исследований, так как кислотный характер гепарина способствует обесцвечиванию мазка крови, придавая ему голубоватый оттенок;
  • подсчета лейкоцитов и тромбоцитов, поскольку гепарин стимулирует агрегацию этих клеток крови;
  • исследований по методике полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Для более чистого разграничения плазмы крови и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие кроме гепарина инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее плазмы, но легче форменных клеток крови, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером.

Фторид натрия/ЭДТА калия (серая крышка пробирки)

Добавление фторида натрия и ЭДТА калия в пробирку позволяет предотвратить разрушение глюкозы крови (процесс, называемый гликолизом) и сохранить ее уровень во взятом образце крови.

Фторид натрия и оксалат калия выступают в качестве антикоагулянтов, связывая ионы Са2+ и, кроме того, фторид натрия стабилизирует уровень глюкозы.

Глюкоза разрушается до пирувата и лактата при последовательном осуществлении различных энзиматических реакций. Фторид натрия ингибирует некоторые ферментативные реакции, включая превращение фосфоглицерата в фосфоенолпируватацид, и предотвращает гликолиз.

Для получения качественного результата анализа необходимо немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта. Плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования — 1 000–1 500G (2 000–3 000 оборотов/минуту).

Пробирки с добавлением фторида натрия и оксалата калия используют для проведения определения уровня сахара (глюкозы) в крови. Соотношение компонентов 1/1, общее количество добавляемых реагентов – 4,5 мг/1 мл забираемой в пробирку крови.

Важное про фторид натрия и ЭДТА калия:

  • Фторид блокирует активность уреазы и некоторых других ферментов.
  • Образцы крови из данных пробирок нельзя использовать для прямого определения энзимов.
  • Фторид натрия и ЭДТА калия связывают ион Са2+, заменяя в крови 1 ион кальция на 2 иона натрия или калия.
  • Следствием этого является повышение напряжения ионов в межклеточной жидкости и выкачивание воды из внутриклеточного пространства в межклеточное, сморщивание клеток крови с умеренным “выдавливанием” из эритроцитов гемоглобина. Поэтому видимый гемолиз свойственен образцам крови с данной добавкой.
  • Глюкоза превращается в лактат в результате комплекса реакций, включающего в себя различные этапы. Фторид ингибирует один их последних этапов разрушения глюкозы, начальные этапы с участием гексокиназы и фосфофруктокиназы блокируются менее эффективно, поэтому можно наблюдать снижение содержания глюкозы в образце крови на 6-7% от первоначального.
  • После первоначального незначительного снижения уровня глюкозы ее количество остается постоянным при хранении крови в пробирке в течение 8-10 часов при температуре до 25ºС и в течение 2-3 дней в холодильнике (+4ºС).

ЭДТА-К2 (сиреневая крышка)

Этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) является предпочтительным антикоагулянтом для гематологических исследований. ЭДТА и его щелочные соли способны создавать хелатные соединения с ионами кальция с образованием растворимых высокостабильных комплексов. Наиболее эффективная концентрация ЭДТА – 1,2 мг/мл крови. Во всем мире используют три варианта солей ЭДТА: ЭДТА-К3, ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2. Наиболее предпочтительной и рекомендуемой Международной Комиссией по Стандартизации в Гематологии является двукалиевая соль ЭДТА:

ЭДТА-К3 показывает меньшую способность поддержания крови в жидком состоянии, также ЭДТА-К3 влияет на подсчет лейкоцитов, занижая их количество.

Различия между ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2 в клиническом плане незначительны и ими можно пренебречь, но ЭДТА-Na2 хуже растворим.

Для получения качественного результата анализа необходимо немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта. Плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования — 1 000-1 500 G (2 000–3 000 оборотов/минуту). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4 000 G c крышечкой и до 12 000 G без крышечки.

Наиболее широко используются пробирки, содержащие 1,95 мг ЭДТА/1мл крови. Они нашли свое применение в таких областях лабораторной практики, как:

  • гематологические исследования – подсчет клеток крови, определение СОЭ и пр. ;
  • ПЦР-исследования (качественные и количественные методики).

Пробирки с образцами крови можно хранить до 6-10 часов при 4ºС, хранение свыше 24 часов не рекомендуется из-за снижения числа эритроцитов и лейкоцитов.

Цитрат натрия (голубая крышка)

Цитрат натрия является антикоагулянтом для сбора венозной крови с це6лью проведения исследований коагуляционных свойств крови.

Процесс свертывания крови представляет собой последовательность сложных реакций, в которых результатом первых реакций (с участием активных ферментов) является активация следующих, первоначально неактивных энзимов. Последним активным ферментом в этой цепочке присутствует тромбин, который осуществляет превращение фибриногена в фибрин. Нити фибрина опутывают клетки крови и окончательно формируют кровяной сгусток. Крайне важную роль на этом этапе играют ионы Са2+. Антикоагуляционные свойства цитрата проявляются в формировании комплекса с ионами Са2+ и эффективном удалении их из крови.

Общее исследование свертывания крови определяется временем, необходимым для последовательной активации ферментов, участвующих в коагуляционном процессе. Проводится определение времени активации и количественное измерение различных составляющих коагуляционного каскада, для чего создаются так называемые “обходные пути” добавлением некоторых промежуточных продуктов свертывания.

Наиболее часто используются пробирки с 3,8% или 3,2% раствором цитрата натрия (0,129 моль/л), соотношение цитрата к количеству забираемой крови 1/9.

Для максимально качественного проведения коагулологических исследований рекомендуется соблюдение определенных правил:

  • нельзя использовать пробирку для взятия крови на коагуляционные тесты первой, сразу после венепункции, так как на результаты может повлиять выделяющийся при пункции тканевой тромбопластин;
  • венозный жгут во время взятия крови в пробирку должен быть снят;
  • немедленно после взятия крови пробирку аккуратно переворачивают 5-6 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта;
  • сразу после этого надо проверить количество взятой крови: ее верхняя граница должна быть на уровне голубой полоски на этикетке.

Оптимальными условиями хранения пробирки с образцом крови является температура 20-24ºС и исследование коагуляционных свойств и факторов свертывания крови должно быть проведено в течение 2-х часов с момента взятия крови.

Оцените статью
Рейтинг автора
4,8
Материал подготовила
Татьяна Лапшаева
Нефролог, врач высшей категории, стаж более 20 лет
А как считаете Вы?
Напишите в комментариях, что вы думаете – согласны
ли со статьей или есть что добавить?
Добавить комментарий