Посев кала на условно-патогенную флору с определением чувствительности к антибиотикам

Качеровская Е.Р. врач лабораторной диагностики;

Чиж О.В.врач лабораторной диагностики

Нормальная микрофлора кишечника выполняет функцию экологического барьера, предотвращающего его колонизацию патогенными микроорганизмами.

Нарушение нормальной микрофлоры при принятии антибиотиков может привести к чрезмерному росту эндогенных или нозокомиальных патогенных микроорганизмов, таких как Clostridium difficile.

  1. difficile является основным этиологическим агентом псевдомембранозного колита, связанного с приемом антибиотиков. Псевдомембранозный колит (ПМК) — острое заболевание кишечника, развивающееся как осложнение антибактериальной терапии и характеризующееся наличием бляшковидных и узелковых псевдомембран в толстом кишечнике (чаще в дистальном отделе ободочной кишки и сигмовидной кишки). При отсутствии лечения исход может быть летальным. Помимо ПМК, C. difficile может быть ассоциирована с более легкими формами колита — антибиотикассоциированный колит (ААК) и антибиотикассоциированная диарея (ААД) на фоне приема антибиотиков.

Нозокомиальное приобретение C. difficile является серьезной проблемой медицинских учреждений, в частности, учреждений с большой плотностью стационарных больных, отделений химиотерапии, а также при долгосрочном нахождении пациентов в стационаре. Грудные дети и больные муковисцидозом являются асимптоматическими носителями токсикогенных штаммов C. difficile с частотой 50 % и 32 % соответственно.

Клиническая диагностика C. difficile основана на нескольких критериях, как правило: диарея с частотой опорожнения кишечника не менее 6 раз за 36 часов (как минимум трехкратный неоформленный стул за сутки) у пациентов, получавших антибиотикотерапию в пределах 8 недель до начала диареи, при отсутствии других очевидных причин диареи, улучшение состояния пациента при лечении.

Изоляты C. difficile могут быть как токсикогенными, так и не токсикогенными. Токсикогенные штаммы C.difficile продуцируют энтеротоксин (токсин A) и цитотоксин (токсин B) а приблизительно эквивалентных количествах.

Тем не менее, некоторые штаммы (серогруппы F) продуцируют токсин B, но не продуцируют токсин A. Эти штаммы можно не определить повсеместно используемыми методами диагностики, основанными на определении только токсина А.

Тест VIDAS C. difficile Toxin A & B (проводится в лаборатории УЗ «3-я ГКБ им.Е.В.Клумова») предназначен для диагностики заболеваний, связанных с наличием Clostridium difficile путем определения токсинов А и В C. difficile в фекалиях.

Для следующих микроорганизмов не было установлено перекрестной реактивности или интерференции при проведении теста VIDAS C. difficile Toxin A & B:

Staphylococcus aureus ssp aureus

Shigella flexneri

Shigella dysenteriae

Shigella sonnei

Salmonella group B (paratyphi B)

Salmonella enteritidis

Pseudomonas aeruginosa

Escherichia coli 0157:H7

Escherichia coli

Candida albicans

Enterococcus faecalis

Yersinia enterocolitica

Bacteroides fragilis

Campylobacter jejuni ssp jejuni

Campylobacter coli

Vibrio cholerae

Aeromonas hydrophila ssp hydrophila

Peptostreptococcus anaerobius

Porphyromonas assacchrolyticus

Clostridium sporogenes

Clostridium bifermentans

Clostridium histolyticum

Clostridium difficile (не токсикогенный) VPI 0210114

Clostridium butyricum

Clostridium subterminale

Clostridium sordelli*

Clostridium perfringens

Clostridium tertium

Clostridium tetani

Clostridium septicum

Clostridium innocuum

Clostridium novyi

Возможна перекрестная реактивность с C.sordelli VPI9048, в зависимости от условий культивирования.

Бактериологический диагноз основан на обнаружении в стуле токсинов В и/или А C. Difficile. Два золотых стандарта, исследование цитотоксичности на клеточной культуре и посев на селективную питательную среду с определением токсикогенности, занимают много времени (минимум 24-48 часов) и плохо стандартизированы.

Для повышения чувствительности и скорости диагностики в настоящее время рекомендуется двухступенчатый алгоритм. На первом этапе выявляют глутаматдегидрогеназу (ГДГ) в стуле, а на втором – подтверждают положительные результаты при помощи второго теста на обнаружение токсинов.

 Оценивая результаты тестирования,  врач должен учитывать клинические признаки и историю болезни пациента.

Правила забора кала для исследований на Clostridium difficile

Специальной подготовки к исследованию не требуется.

Ограничений в диете нет.

Соберите образец кала в чистую пробирку.

Важно: Образец должен быть собран без добавления какого-либо химического или биологического вещества в пробирку для сбора образца.

 Не используйте контейнеры для образцов, содержащие детергенты, консерванты и среды, поскольку это может привести к получению неверных результатов.

Образцы можно хранить до начала обработки в течение 3 суток (с момента взятия) при 2 — 8°C без значительной потери определяемых количеств токсинов А и В C. difficile.

Более длительное хранение при 2 — 8°C не рекомендуется.

При необходимости более длительного хранения образцы можно заморозить и хранить при -70 °C ± 10°C до 1 месяца.

Не замораживайте образцы повторно.

В ходе клинических исследований не было обнаружено интерференции при тестировании образцов, содержащих большие количества слизи или крови при определении токсинов А и В C. Difficile

При определении ГДГ возможно взаимодействие с некоторыми лекарственными средствами и другими потенциальными интерферирующими веществами (гемоглобин, липиды, муцин, амоксициллин, висмута салицилат, кальция карбонат, цефтриаксон, бензалкония хлорид, ципрофлоксацин, эритромицин, этанол, фидаксомицин, гентамицин, минеральное масло, гидрокортизон, алюминия гидроксид, магния гидроксид, лидокаин, лоперамид, месалазин, метронидазол, напроксен, нистатин, фенилэфрин, сеннозид, тергитол, тетрациклин, ванкомицин), превышающими определенные концентрации.

При получении спорного результата при определении токсинов А и В C. Difficile, рекомендуется повторить анализ с повторно взятым образцом, поскольку распределение токсинов в некоторых образцах может быть неравномерным.

Новый образец должен быть взят в течение двух недель, должен согласовываться с клинической картиной и историей болезни. При повторном получении спорного результата образец следует протестировать другим методом.

Оценивая результаты тестирования, врач должен учитывать клинические признаки и историю болезни пациента.

УЗ «3-я ГКБ им.Е.В.Клумова» проводит на платной основе исследования для диагностики заболеваний, связанных с наличием Clostridium difficile путем определения в фекалиях:

  1. глутаматдегидрогеназы (VIDAS C. Difficile GDH)
  2. токсинов А и В C. difficile (VIDAS C. difficile Toxin A & B).

Бактериофаги – уникальные микроорганизмы. Их антибактериальная активность достигается внедрением в клетку возбудителя, последующим размножением и распадом бактерии. Для лечения бактериальных заболеваний могут применяться либо антибиотики, либо бактериофаги, либо проводят совместную терапию. В каких случаях необходимо назначать антибиотики, а когда – бактериофаги? Все ответы в нашей статье.

Зачем делать анализ

Одна из ключевых проблем, послужившая развитию антибиотикорезистентности бактерий, – неправильное применение антибиотиков или противомикробных препаратов.

Когда к врачу обращается пациент с острым течением заболевания, антибиотики в большинстве случаев назначают сразу, без предварительного определения чувствительности возбудителя.

Специалист назначает антибиотик исходя из собственного опыта, учитывая рекомендации по активности препарата в отношении бактерий, наиболее часто вызывающих данное заболевание. Выбор антибиотика зачастую продиктован клинической ситуацией: необходимо устранить острые симптомы воспаления, что возможно только при ликвидации микроорганизма как причины, его вызывающей. Одновременно с назначением антибиотика врач направляет на анализ по определению чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам и бактериофагам. Результаты анализа обычно готовы в течение 3–4-х дней.

Если врач по каким-либо причинам не назначил анализ на чувствительность к антибиотикам и бактериофагам, вы можете сделать его по своему желанию в клинической лаборатории, где проводят такие тесты. image

Важные требования к подбору антибактериального препарата на первом этапе: правильная дозировка, узкий спектр активности. Корректное назначение антибиотика определяет возможность формирования к нему устойчивости у бактерий. К сожалению, часто случается наоборот: некорректно назначенный препарат катализирует процесс мутаций у бактерий и формирует устойчивость их к антибиотикам.

Резистентность к противомикробным средствам – серьезная проблема, представляющая угрозу для здоровья людей во всех регионах нашей планеты. Однако появление микроорганизмов, стойких к антибиотикам, послужило толчком к активному изучению бактериофагов.

Препараты бактериофагов рассматривают как альтернативу антибиотикам. В отличие от антибактериальных препаратов бактериофаги воздействуют только на возбудителя заболевания, не затрагивая нормальную флору человеческого организма. Препараты бактериофагов можно принимать в сочетании с другими антибактериальными средствами, что усиливает противобактериальный эффект и позволяет снизить дозу антибиотика.

Совместное назначение бактериофагов с противовирусными препаратами противопоказано.

Чтобы достичь нужного эффекта при лечении любым антибактериальным препаратом и препаратом бактериофага, необходимо пройти тест на чувствительность возбудителя.

Как проводят тест

Принцип определения чувствительности бактерий к антибиотикам и бактериофагам одинаковый. На первом этапе работают с бактериями, выделенными из патологического содержимого – раны, мочи, мазка со слизистой. Далее в питательную среду добавляют антибиотики разных групп и бактерии.

Антибиотикограмму – перечень антибактериальных препаратов, к которым чувствителен выделенный возбудитель, получают с помощью современных стандартизованных методов: серийных разведений или диффузионных методов (диско-диффузионных и Е-тестов).

image Метод серийных разведений Антибиотик в различных разведениях помещают в жидкую питательную среду (бульон) или агар, куда добавляют бактериальную суспензию. По наличию или отсутствию роста микроорганизмов в питательной среде оценивают эффективность антибиотика, определяют его минимальную подавляющую концентрацию. Диско-диффузионный метод В питательную среду с ранее внесенной бактериальной суспензией помещают бумажные диски с антибиотиками. Вследствие диффузии антибиотика происходит подавление роста микроорганизмов, и по диаметру зон задержки роста судят о чувствительности культуры. Е-тест Это полоска, на которую нанесен градиент концентрации антибиотика. Исследование проводят аналогично диско-диффузионному методу. Метод слепого пятна Классический тест на определение чувствительности к бактериофагам. В клинических лабораториях и на производстве применяют метод титрования. Выделенные из патологического содержимого бактерии засевают в питательную среду вместе с бактериофагом. Появление стерильных округлых пятен говорит о лизисе (растворении клеток) бактерий с образованием колоний бактериофагов. Просветление среды (формирование прозрачных зон) подтверждает чувствительность бактерий к бактериофагу. По спектру действия выделяют моновалентные бактериофаги, которые лизируют бактерии одного вида, и поливалентные – разрушающие бактерии нескольких видов.

Расшифровка результатов анализа

На бланке теста будут обозначения в виде букв R или S. R (Resistant) – резистентность бактерий к данному бактериофагу или антибиотику, S (Sensitive) – чувствительность возбудителя к препарату.

Если результат теста R, лечение данным фаговым препаратом неэффективно, S говорит о том, что бактериофаг или антибиотик можно назначать. Если возбудитель чувствителен к определенной группе антибиотиков и резистентен к бактериофагу, назначают антибактериальные препараты, и наоборот.

Тест на антибиотико- и фагочувствительность помогает определить, справится препарат с возбудителем инфекции или нет. Это важный показатель, на который ориентируются специалисты при выборе схемы лечения.

АО «НПО «Микроген» выпускает широкий спектр бактериофагов, что расширяет возможности фаготерапии и позволяет корректно подобрать препарат, к которому чувствительны патогенные бактерии.

Кликните на аптеку, чтобы сразу перейти к покупке препарата: Свяжитесь с нами Ваш вопрос отправлен.

Спасибо за то, что задали свой вопрос.

Ваша заявка отправлена.

Спасибо за проявленный интерес.

Вы подписаны на рассылку! Спасибо! Ваше сообщение отправлено.

Анализ кала

В 

Лаборатория «Сиблабсервис» предлагает несколько видов анализа кала, которые делаются в профилактических или диагностических целях. Наиболее распространенный из них — копрограмма. Она представляет собой исследование состава кала, помогающее выявить заболевания пищеварительной системы:

  • нарушения работы желудка;
  • наличие воспалительных процессов в желудочно-кишечном тракте;
  • колиты;
  • нарушение функций желудка, печени, поджелудочной железы;
  • нарушение всасывания тонкой и двенадцатиперстной кишки.

Анализ кала показывает наличие лейкоцитов, эритроцитов, яиц глистов, слизи и др. Кал проверяется физическим, химическим и микроскопическим путями, определяется цвет и состав. Результаты медицинского исследования сравниваются с нормой, выявляются отклонения.

Отдельно возможна проверка скрытой крови в кале. «Сиблабсервис» применяет несколько методов нахождения в кишечнике простейших и яиц гельминтов. Кроме того, мы осуществляем так называемую «Пробу Бенедикта» — определяем содержание углеводов в кале.

Копроскопия

Перед копроскопией пациентам рекомендуется соблюдать диету в течение 4-5 дней. Употребляйте молочные продукты, свежие фрукты, белый хлеб, вареный картофель, яйца всмятку. Все лекарственные препараты, которые могут повлиять на пищеварение, отменяются за неделю до сбора.

В зависимости от анализа кала, результат нужно ждать 1-5 дней. Самая сложная, дорогостоящая и длительная диагностика — проверка кала на Helicobacter pylori. Это спиралевидная бактерия, которая обитает в желудке и кишечнике, усиливая агрессивные свойства и ослабляя защиту. В развитых странах мира примерно 50 % жителей страдают хронической формой инфекции Н. pylori, которая многократно увеличивает вероятность образования пептических язв. Вот почему важно проводить тест на Helicobacter pylori при малейших симптомах — как минимум, чтобы исключить бактерии и продолжить искать болезнь.

Если удалось определить заболевание, врач назначает лечение, если нет — дальнейшее обследование. Часто после диагностики кала требуется сделать анализ крови.

Виды исследований

Мы проводим следующие исследования кала:

  • На дисбактериоз. Определяется количество полезных и патогенных микроорганизмов. Бактериологическое исследование нужно при неустойчивом стуле (плотные массы, вызывающие запоры, или понос), плохом переваривании пищи, болях в области желудочно-кишечного тракта, других процессах, требующих медицинского обследования, заболеваниях кишечника и различных синдромах, колите, (нарушение функций толстой кишки, воспаление мышечных оболочек и соединительной ткани).
  • На энтеробиоз. Соскоб для обнаружения паразитов. Местом обитания остриц в организме является прямая и толстая кишка, соскоб берётся у анального отверстия, где самки откладывают яйца в большом количестве.
  • На гельминтов. Анализ направлен на обнаружение глистов и их яиц в исследуемом материале.
  • На скрытую кровь. Цель — выявление кровотечения в тракте. Показатель того, что необходимо обратиться в медицинское учреждение за услугой — не обычный коричневый цвет, а дёгтеобразный вид и консистенция каловых масс, кровяные волокна, язвенная болезнь.

Подготовка к сдаче анализа каловых масс заключается в отказе от слабительных средств, препаратов, содержащих железо, проведении клизм.

Расшифровка анализа проводится медицинскими работниками. Они определят количество присутствия стеркобилина (продукта билирубина), кислотность и т. д., выявят, нет ли язвенных или других кровотечений, крахмала, желчи, выделяемой желчным пузырём, жирных кислот.

Нарушение функций ЖКТ требует лечения для восстановления здоровья, — будь то небольшие сбои или язвенная болезнь.

Каловые массы собираются в контейнер и сдаются в лабораторию.

В 

Ознакомиться со стоимостью анализов вы можете в разделе «Анализы и Цены»

Наименование анализа

Общеклинические исследования и анализ кала 50042Анализ кала на Helicobacter pylori 7005 25304Анализ кала на скрытую кровь 1301 25300Анализ кала на скрытую кровь (иммунологическим методом) 5501 25303Анализ кала на яйца глистов (бактериоскопия) 1401 25302Анализ кала на выявление энтеробиоза методом соскоба 1401 25301Копроскопия 2751 25305Микроскопическое исследование кала на простейшие 1401 50043Содержание углеводов 3302 Анализ кала на яйца гельминтов и простейшие кишечника методом обогащения 25307Анализ кала на гельминты 3005 25306Анализ кала на простейшие 3005

Эшерихия коли

E.coli в моче

Кишечная палочка норма у ребенка

Гемолизирующая кишечная палочка

В норме ее быть не должно. Она может вызывать аллергию, проблемы с кишечником, особенно у детей с ослабленной иммунной защитой.

Лактозонегативная кишечная палочка (она же кишечная палочка со сниженной ферментативной активностью)

Лактозонегативная кишечная палочка в превышающих норму титрах говорит о начале дисбактериоза и является сигналом для проверки организма на вероятное присутствие в кишечнике глистов/простейших. Превышение ( N 10*5 ) может протекать в виде сепсиса, вторичной пневмонии, инфекции мочевыводящих путей.

Кишечная палочка лечение

Синонимы русскиеКакой биоматериал можно использовать для исследования?Как правильно подготовиться к исследованию?Общая информация об исследованииДля чего используется исследование?Когда назначается исследование?Что означают результаты?Что может влиять на результат?Также рекомендуетсяКто назначает исследование?

Микробиологическое исследование, позволяющее качественно и количественно охарактеризовать условно-патогенную флору кишечника, а также определить чувствительность к антибиотикам отдельных ее представителей.

Для чего используется этот анализ?

  • Для диагностики заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, и контроля за эффективностью их лечения.

Когда назначается анализ?

  • Когда есть подозрение на кишечные инфекции, вызываемые условно-патогенными микроорганизмами.
  • При дифференциальной диагностике нарушений условно-патогенной флоры, протекающих со сходными симптомами.

Синонимы русские

Условно-патогенные микроорганизмы, условно-патогенные бактерии, условно-патогенные микробы, условно-патогенные возбудители, анализ на дисбактериоз, анализ на УПФ.

Синонимы английские

Opportunistic pathogens, opportunistic flora, opportunistic organisms, antibiotic susceptibility.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Условно-патогенная флора – это микроорганизмы, которые присутствуют у человека в умеренных количествах. Однако при определенных условиях их количество увеличивается и превышает допустимую норму, что приводит к соответствующим заболеваниям. К наиболее распространенным представителям условно-патогенной флоры кишечника относятся: золотистый стафилококк (S. aureus), клебсиеллы (Klebsiella), эшерихии (Escherichia), энтеробактер (Enterobacter), цитробактер (Citrobacter) и ацинетобактер (Acinetobacter), протей (Proteus), клостридии (Clostridia), серрации (Serratia), псевдомонады (Pseudomonas), дрожжеподобные грибы (Candida и др.) и другие возбудители. Эти микроорганизмы могут вызывать инфекционное поражение желудочно-кишечного тракта с развитием гастроэнтерита, энтерита и энтероколита.

Посев кала на условно-патогенную флору с определением чувствительности к антибиотикам используется для диагностики кишечных инфекций, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, а также для определения чувствительности этих возбудителей к антибиотикам.

Для чего используется исследование?

  • Для установления возбудителя кишечной инфекции.
  • Для дифференциальной диагностики (наряду с другими исследованиями) заболеваний, протекающих со сходными симптомами (диарея, воспалительные заболевания кишечника, колоректальный рак, болезни, сопровождающиеся нарушением всасывания).
  • Для того чтобы оценить эффективность проводимой антибактериальной терапии.

Когда назначается исследование?

  • При симптомах кишечной инфекции.

Что означают результаты?

Если в посеве наблюдается умеренный рост условно-патогенных микроорганизмов (не превышающий норму), то утверждать, что они вызвали кишечную инфекцию, нельзя. Обильный рост условно-патогенных микроорганизмов (превышающий норму) свидетельствует о том, что они явились причиной развития инфекции.

Что может влиять на результат?

Предшествующая антибактериальная терапия или химиотерапия, задержка транспортировки материала в лабораторию ведут к ложноотрицательному результату.

Также рекомендуется

  • Посев кала на патогенную флору (диз. группа и тифопаратифозная группа) с определением чувствительности к антибиотикам
  • Посев на золотистый стафилококк (S. aureus)
  • Посев на золотистый стафилококк (S. aureus) с определением чувствительности к антибиотикам
  • Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов
  • Анализ кала на цисты и вегетативные формы простейших
  • Дисбактериоз кишечника с определением чувствительности к антибиотикам
  • Копрограмма
  • Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, педиатр, гастроэнтеролог, инфекционист.

Литература

  • Энциклопедия клинических лабораторных тестов / под ред. Н. У. Тица. – М. : «Лабинформ», 1997. – 942 с.
  • Руководство по инфекционным болезням / под ред. Ю. В. Лобзина, С. С. Козлова, А. Н. Ускова. – CПб. : Феникс, 2001. – 932 с.

Оцените статью
Рейтинг автора
4,8
Материал подготовила
Татьяна Лапшаева
Нефролог, врач высшей категории, стаж более 20 лет
А как считаете Вы?
Напишите в комментариях, что вы думаете – согласны
ли со статьей или есть что добавить?
Добавить комментарий