ПЦР-диагностика (венозная кровь) — сдать анализы в Москве. Научный центр «ЭФиС»

Консультация инфекциониста / Игорь 2875 просмотров 15 июля 2020

На сервисе СпросиВрача доступна консультация инфекциониста по любой волнующей Вас проблеме. Врачи-эксперты оказывают консультации круглосуточно и бесплатно. Задайте свой вопрос и получите ответ сразу же!

Ответы врачей Пожаловаться image Нина Извозчикова, 15 июля 2020 Инфекционист Здравствуйте! Для определения нагрузки надо сдать кровь на вирус гепатита С методом ПЦР количественно.Сдайте также биохимию крови и сделайте фиброскан печени. Пожаловаться image Павел Александров, 15 июля 2020 Инфекционист, Гепатолог Здравствуйте. Это значит ранее болели гепатитом, для уточнения сдайте ПЦР крови на гепатит С качественно, АЛТ. Если будет положительным нужно очно посетить инфекциониста Пожаловаться Галина Корчагина, 16 июля 2020 Уролог, Андролог Здравствуйте! Вам нужно сдать кровь ПЦР методом на гепатит С количественно для определения нагрузки. Сейчас по результату Вы встречались ранее с гепатитом С. Пожаловаться Игорь, 16 июля 2020 Клиент Галина, почему «встречались ранее»? Данные показатели показывают, что болезнь «спит» и не наносит вреда? (предположительно). Пожаловаться Галина Корчагина, 16 июля 2020 Уролог, Андролог Нет, они показывают, что Вы ранее болели гепатитом С, а что в данный момент, без анализа ПЦР, не ясно. + 1 Пожаловаться Наталья Быкова, 16 июля 2020 Инфекционист, Гепатолог Добрый день. Вероятнее всего, вирус неактивен. Не исключено спонтанное разрешение гепатита. Но нужно пару лет понаблюдаться, чтобы ничего не пропустить. Сейчас нужно сдать ПЦР качественно, соглашусь с коллегами. Пожаловаться Игорь, 16 июля 2020 Клиент Наталья, что значит вирус неактивен? Мне также 10лет назад сказали, когда первично обнаружили гепатит. Сказали, что лечить не надо… Пожалуйста, проясните, что это значит. Я хотел купить индийские препараты пролечиться и за свое здоровье переживаю. Пожаловаться Наталья Быкова, 16 июля 2020 Инфекционист, Гепатолог Хронический гепатит С бывает активным при положительной ПЦР на РНК-ВГС в крови, в этом случае его нужно лечить, что успешно сейчас и делается. Также хронический гепатит С бывает неактивным при отрицательной ПЦР, но положительными антителами с высоким КП , то есть цифры должны быть высокими — более 10 — по всем четырем видам антител к core, NS 3-5 или к 3м из них. У Вас 19ть только к к core, при этом к 3м остальным ничтожно маленькие КП. У своих пациентов я это наблюдаю при выздоровлении после ПВТ или при спонтанной ремиссии (самопроизвольное выздоровление), да, такие счастливчики есть. Поскольку мы с коллегами Вас не знаем и не наблюдали, то разумеется рекомендуем ПЦР, биохимию для доказательства отсутствия активности вируса. Вполне возможно, что ПВТ Вам не понадобится. Похожие вопросы по теме Пролиферация кубического эпителия 1 ответ 15 апреля 2018 Игорь, Волжск Вопрос закрыт ВЭБ инфекция 4 ответа 26 августа 2019 Ирина Вопрос закрыт Анализ на сифилис 12 ответов 21 февраля 2020 Екатерина Вопрос закрыт Вопрос о гепатите с, антитела 1 ответ 14 апреля 2020 Владимир Вопрос закрыт Добрый день! Помогите с анализами крови пожалуйста! 1 ответ 25 декабря 2020 Иван, Псков Вопрос закрыт Что делать, если я не нашел ответ на свой вопрос?

Если у Вас похожий или аналогичный вопрос, но Вы не нашли на него ответ — получите свою 03 онлайн консультацию от врача эксперта.

Если Вы хотите получить более подробную консультацию врача и решить проблему быстро и индивидуально — задайте платный вопрос в приватном личном сообщении. Будьте здоровы!

Почти каждый третий человек на планете является либо носителем вируса гепатита В, либо заражен им. Государственные программы во многих странах предполагают выявление маркёров гепатита В среди населения. Антиген HbsAg является наиболее ранним сигналом инфицирования. Как выявить его наличие в организме и как расшифровать результаты анализа? Будем разбираться в этой статье.

Анализ крови на HBsAg позволяет в короткие сроки выявить количественное содержание антигена вируса гепатита B. Где можно получить услугу?

Тест на HBsAg: почему назначается анализ?

Вирус гепатита В (HBV) представляет собой цепочку ДНК, окруженную белковой оболочки. Именно эта оболочка носит название HBsAg – hepatits B surface antigen. Первая иммунная реакция организма, призванная уничтожить HBV, направлена именно на этот антиген. Попав в кровь, вирус начинает активно размножаться. Через некоторое время иммунная система распознает возбудителя и вырабатывает специфические антитела – аnti-HBs, которые в большинстве случаев способствуют излечению от острой формы заболевания.

Существует несколько маркёров на определение гепатита В. HBsAg является самым ранним из них, с его помощью можно определить предрасположенность к заболеванию, выявить само заболевание и определить его форму – острую или хроническую. HBsAg заметен в крови на 3–6 неделе после заражения. Если этот антиген находится в организме больше полугода в активной стадии, то врачи ставят диагноз «хронический гепатит В».

  • Люди, не имеющие признаков инфицирования, могут стать носителями возбудителя и сами того не желая – заразить окружающих.
  • По неизвестным причинам среди мужчин чаще встречаются носители антигена, чем среди женщин.
  • Носитель вируса или переболевший гепатитом В не может быть донором крови, он обязан встать на учет и регулярно сдавать анализы.

Из-за широкого распространения гепатита В во многих районах и областях России проводят скрининг. При желании пройти исследование может любой человек, однако существуют определенные группы людей, которые обязаны обследоваться:

  • беременные женщины два раза в течение всей беременности: при становлении на учет в женскую консультацию и в предродовой период;
  • медицинские работники, которые контактируют напрямую с кровью пациентов – медсестры, хирурги, гинекологи, акушеры, стоматологи и другие;
  • лица, которые нуждаются в хирургическом вмешательстве;
  • лица, являющиеся носителями или болеющие острой или хронической формой гепатита В.

Как отмечалось выше, у гепатита В есть две формы: хроническая и острая.

Если хроническая форма не является последствием острого гепатита, то практически невозможно установить, когда началась болезнь. Это происходит из-за слабо выраженного течения заболевания. Чаще всего хроническая форма встречается у новорожденных, чьи матери являются носителями вируса, и у людей, в крови которых антиген находился больше полугода.

Острая форма гепатита ярко выражена только у четверти зараженных. Она длится от 1 до 6 месяцев и имеет ряд симптомов, схожих с обычной простудой: потеря аппетита, непроходящая усталость, быстрая утомляемость, боль в суставах, тошнота, повышение температуры, кашель, насморк и дискомфорт в правом подреберье. Если у вас присутствуют эти симптомы – необходимо срочно обратиться к врачу! Без правильного лечения, начатого в срок, человек может впасть в кому или даже умереть.

Если помимо вышеперечисленных симптомов у вас был незащищенный половой контакт с малознакомым человеком, если вы пользовались чужими средствами личной гигиены (зубная щетка, расческа, бритвенный станок), вам следует немедленного сдать анализ крови на HBsAg.

Подготовка к анализу и проведение процедуры

Выявить наличие гепатита В помогают два метода: экспресс-диагностика и серологическая лабораторная диагностика. Первый тип исследования относят к качественным методам обнаружения, так как он позволяет узнать, есть ли в крови антиген или нет, возможен – в домашних условиях. Если антиген обнаруживается, стоит обратиться в больницу и пройти серологическую диагностику, которая относится к количественным методам. Дополнительные лабораторные исследования (методы ИФА и ПЦР) дают более точное определение болезни. Для проведения количественного анализа требуются специальные реактивы и оборудование.

Экспресс-диагностика

Поскольку этот способ достоверно и быстро диагностирует HBsAg, то выполнить его можно не только в медицинском учреждении, но и в домашних условиях, беспрепятственно купив в любой аптеке набор для экспресс-диагностики. Порядок ее проведения таков:

  • обработать палец спиртовым раствором;
  • проколоть кожу скарификатором или ланцетом;
  • капнуть 3 капли крови на полоску-тестер. Чтобы не исказить результат анализа, не стоит касаться пальцем поверхности полоски;
  • через 1 минуту добавить на полоску 3-4 капли буферного раствора из набора;
  • через 10–15 минут можно увидеть результат анализа HBsAg.

Серологическая лабораторная диагностика

Данный вид диагностики отличается от предыдущего. Его главная особенность – точность: он определяет наличие антигена через 3 недели после заражения, вместе с этим способен обнаружить антитела anti-HBs, которые появляются при выздоровлении больного и формируют иммунитет к гепатиту В. Также, при положительном результате, анализ HBsAg выявляет тип вируса гепатита В (носительство, острая форма, хроническая форма, инкубационный период).

Количественный анализ интерпретируется следующим образом: < 0,05 МЕ/мл – отрицательный результат; ≥ 0,05 МЕ/мл – положительный результат.

Особой подготовки перед забором крови (будь то качественный или количественный метод) не требуется, главное, чтобы анализ проводился натощак (не принимать пищу за 10–12 часов). В течение 1–2 недель не употреблять лекарственные препараты, накануне анализа не пить спиртное, ограничить физические нагрузки.

Для сдачи анализа нужна венозная кровь в объеме от 5 до 10 мл. На подготовку результата уходит один-два рабочих дня.

Расшифровка результатов

В результате исследования крови можно получить такие результаты:

  • отрицательный, HBsAg не обнаружен в крови. В домашних условиях это можно определить по одной полоске на тестере;
  • положительный, нужно пройти дополнительное обследование. В домашних условиях на тестере появились две контрольные полоски – «маячок» о наличии антигена в организме.

Анализа на НВsAg «отрицательный»

При экспресс-анализе и серодиагностике нормой является отсутствие антигена в крови. Если есть сомнения в правильности постановки диагноза (например, пациент плотно позавтракал перед сдачей крови), то лучше вновь пройти один из видов диагностики либо сдать анализы на другие маркёры гепатита В: НВеАg – anti-НВе, НВsAg – anti-НВs, anti-НВс (IgG; IgМ), НВеАg, anti-НВс IgM. Если результат снова окажется отрицательным, то заражения действительно не произошло.

НВsAg «положительный»: что это значит?

Положительный результат говорит о заражении гепатитом В. Результат необходимо подтвердить повторным анализом, и сдать кровь на другие маркёры для выяснения формы болезни: носительство, острый или хронический гепатит В, инкубационный период. Для отслеживания заболевания при положительном результате необходимо регулярно сдавать кровь на анализ HBsAg.

Согласно законодательству РФ, информация о положительных результатах анализов на маркёры гепатита В передается в Отдел учета и регистрации инфекционных заболеваний Госсанэпиднадзора.

Чтобы сдать анализ HBsAg, необходимо иметь паспорт или любой другой документ, подтверждающий личность. Если такового не оказалось, то желающий может пройти исследование анонимно, но в этом случае при положительном результате человек не может быть госпитализирован и не подлежит регистрации в Отделе учета.

При проведении грамотного лечения в организме пациента должны вырабатываться антитела – anti-HBs. Если их количество будет расти, то можно с уверенностью сказать, что пациент идет на поправку. После выздоровления человек приобретает иммунитет к данному виду гепатита.

Профилактика гепатита В

Чтобы предотвратить заражение вирусной инфекцией, стоит тщательно следить за соблюдением правил личной гигиены, пользоваться барьерными методами контрацепции, проходить вакцинацию и раз в два года сдавать анализы в профилактических целях.

Новорожденных вакцинируют в первые 12 часов жизни, затем их прививают через 1 месяц, а после – через 6. Детям до 3-х лет вакцину вводят внутримышечно в боковую поверхность бедра, старше 3-х лет – в плечо. Совершеннолетние граждане сами решают, прививаться им или нет. Любая вакцина от гепатита В обеспечивает защиту на 5–7 лет. В течение этого срока изучают количество anti-HBs-антител в крови. Если антител меньше 10 Ед/л, то прививку делают немедленно, если от 11 до 100 Ед/л – через 3–6 месяцев, от 101 до 1000 – через год, от 1001 до 10000 – через 3,5 года, более 10000 – через 7 лет.

Теория и практика / Диагностика и лечение Анализ на вирусные гепатиты сегодня не просто скрининг – его требуют сдать перед любой операцией, и даже гастроскопией. И иногда результат неожиданно положительный. К счастью, это не всегда означает, что вы больны.

На сегодняшний день известно около десятка различных вариантов вируса, поражающего печень.  Самые распространенные из них – это гепатиты В и С. Опасность заключается в способности болезни переходить в хроническую форму. Для вируса типа В эта вероятность составляет около 15%, для С – которому врачи дали прозвище «ласковый убийца», более 85%.  А еще эти инфекции очень часто протекают стерто.  Заразившись, человек либо совсем не ощущает симптомов, либо чувствует общее недомогание, которое списывает на хроническую усталость или подхваченное ОРВИ. Тем временем вирус ведет свою разрушительную работу. К счастью, вирусы за редким исключением не передаются контактно-бытовым путем (это не относится к случаям, когда два человека пользуются одной бритвой или зубной щеткой), основные пути передачи – половой и парентеральный (через кровь).

Гепатит В намного заразнее гепатита С – для заражения достаточно одного незащищенного полового акта или использования после больного маникюрных ножниц.

Что же делать, если результат анализа положительный? Первое – не паниковать: не менее чем в 5% случаев к слову «положительный» можно добавить приставку «ложно».  Несмотря на высокую чувствительность и специфичность теста, он основан на анализе иммунитета, а это слишком нестабильная материя.  Причиной ложноположительного результата может оказаться целый ряд факторов, среди которых беременность, аутоиммунные заболевания, недавний прием, влияющих на иммунитет, лекарств, и даже ОРВИ с поражением верхних дыхательных путей или недавняя вакцинация от гриппа или столбняка.  По правилам, получив положительный результат на гепатит В или С, лаборатория должна сделать контрольный анализ или провести ПЦР-диагностику, но, к сожалению, так происходит не всегда. Да и повторный анализ того же самого образца крови может вновь оказаться ложноположительным. Поэтому, если не была проведена ПЦР-диагностика, врачи рекомендуют пересдать анализ через 1-2 недели в другой лаборатории.

Важно отметить, что прежде всего речь идет о скрининговых маркерах гепатитов: для гепатита B- это HbsAg, а для гепатита С AntiHCV.

Наша справка

Скрининговый маркер гепатита B – HbsAg, или, как его еще называют, австралийский антиген. Это самый ранний показатель болезни, он появляется в крови еще до повышения уровня печеночных ферментов. У здорового человека в крови он не определяется. Положительный результат свидетельствует о остром гепатите В, хроническом гепатите В или носительстве вируса.

AntiHCV. это основной скрининговый показатель гепатита С. Появляется в крови через 4-6 недель после заражения и в дальнейшем выявляется постоянно. Выявление положительного маркера говорит о том, что человек был инфицирован вирусом гепатита С и либо излечился от него, что бывает примерно в 15% от всех случаев заражения, либо является больным острой или хронической формой заболевания.

Если эти анализы окажутся положительными, врач инфекционист или гепатолог назначит ряд уточняющих анализов, которые расскажут о стадии гепатита, его активности, генотипе вируса и других особенностях заболевания.

Уточняющие анализы при гепатите В

HBeAg – показатель активной репликации (размножения) вируса в организме. Этот маркер свидетельствует от высокой активности вируса, что может быть как при острой, так и при хронической форме. Если активность низкая, выдается ответ отрицательно. Положительный HBeAg в сочетании с высокими показателями печеночных ферментов — одно из показаний к началу антивирусной терапии.

AntiHBctotal— антитела могут свидетельствовать о текущем, либо о перенесенном гепатите В. Это один из маркеров, указывающий на перенесенный в прошлом гепатит В, который не перешел в хроническую форму, то есть произошло излечение от заболевания.

AntiHBcIgM – маркер острого гепатита. Появляется в крови при активном остром гепатите, а также если «проснулся» длительно существовавший, неактивный хронический гепатит. Через 6 месяцев после завершения острого процесса этот маркер исчезает из крови. Часто этот маркер используют для наблюдения за неактивным хроническим гепатитом В и за носителями, чтобы не пропустить возможное обострение.

AntiHBe– это маркер становится положительным, когда активность вируса гепатита В значительно снижается, то есть это у больных острой формой его обнаружение чаще всего свидетельствует о начавшемся выздоровлении. Также важен для контроля эффективности лечения.

AntiHBsAb – показатель наличия иммунитета к гепатиту В. У людей, которые в своей жизни не встречались в вирусом гепатита В этот показатель близок к нулю. Если человек перенес гепатит В и излечился, формируется иммунитет, проявлением которого является повышение уровня антител (от 1000 до 10000 Ед/л и более).  Также уровень антител повышается после вакцинации, в дальнейшем анализ сдают для оценки напряженности иммунитета и расчета сроков повторной вакцинации (см. табл.).

Anti-HBS Ед/л

Рекомендуемый срок вакцинации

Менее 10

немедленно

11-100

Через 3-6 месяцев

100-1000

Через 1 год

1000-10000

Через 3,5 года

Более 10000

Через 7 лет

Качественное определение вируса ДНК (HBVDNA кач.)  — это самый ранний показатель заражения вирусом гепатита В – показатель можно использовать для скрининга в группах риска (например, если был контакт с кровью или незащищенный половой акт с больным вирусным исследований.

Количественно определение вируса ДНК (HBVDNA колич.)  — этот показатель дает точную цифру – сколько вируса в данный момент находится в крови, то есть показывает так называемую вирусную нагрузку. Используется для определения степени активности процесса, выявления показаний к началу антиретровирусной терапии и оценки эффективности лечения.

Уточняющие анализы при гепатите С

Качественное определение РНК вируса гепатита С (HCVRNA кач.)По аналогии ПЦР –диагностикой гепатита В этот анализ дает точный ответ, есть ли вирус в организме человека. Точность этого теста превышает 98%. А еще это самый ранний анализ на возможное заражение –РНК вируса можно выявить в крови уже 10 дней после предполагаемого заражения.

Вопреки расхожему мнению, гепатит С практически не передается половым путем – риск составляет от 2,5 до 5 процентов.

Количественное определение РНК вируса гепатита С (HCVRNA колич.) как и в случае с гепатитом В, определяет степень вирусной нагрузки. Применяется для выявления показаний к началу терапии и контроля эффективности лечения. Также позволяет определить, какой из нескольких типов вируса вызвал заболевание. От генотипа зависит прогноз заболевания (есть более «злые» и более «мягкие» вирусы) и схема лечения.

В любом случае, помните — положительный маркер не гепатит может оказаться ложным, а может указывает лишь на то, что вы когда-то перенесли стертую форму заболевания, но иммунитет справился и произошло самоизлечение. Не спешите паниковать, не прочитав эту статью и не пройдя консультацию инфекциониста, специализирующегося на вирусных гепатитах.

Автор: Алексей Федоров Опубликовано: 27 сентября 2017 г. Журнал «Здоровье»№9 2017 Журнальный заголовок: «По следу вируса»  Войти | Регистрация * Авторизация

Вы можете авторизоваться на сайте при помощи:

Забыли пароль?    Регистрация Регистрация

Введите e-mail адрес, указанный при регистрации

Регистрация

Зарегистрировавшись, вы сможете:

  • комментировать статьи и блоги,
  • бесплатно получать онлайн-консультации у специалистов,
  • пользоваться сервисами,
  • участвовать в конкурсах,
  • общаться на форуме.

Последние комментарии

Kr_80@mail.ru [3 дня назад] Предупреждён — значит вооружён! Спасибо за статью! Queeny [17 дней назад] Очень полезная статья. Давно что-то подобное искала! Jade17 [26 дней назад] вы правы!

Еще в рубрике

«Мы живем в мире, где худое тело имеет высокую ценность»

Наш гость: Светлана Бронникова, психотерапевт…

Как защитить глаза от влияния компьютера

Каждый второй россиянин имеет проблемы со зрением…

ЭКО: что влияет на здоровье ребенка?

По статистике, женщины в возрасте 45-49 лет сейчас…

5 факторов, влияющих на сон

Зимой с утра мы часто выглядим как сонные мухи, а…

Вспомогательные элементы

Организм беременной женщины перестраивается на…

В помощь пищеварению

Бывает, что даже самая полезная еда падает в желудок…

Чем дольше человек курит, чем больше сигарет выкуривает, тем выше частота рака

Михаил Кропотов, профессор, доктор медицинских наук…

УШЁЛ, НО ОСТАВИЛ СЛЕД

Многие из нас переболели COVID-19. К несчастью…

Теория и практика Лекарства Диагностика и лечение Психический комфорт Инновации Первая помощь Красота Ежедневный уход Салонные процедуры Эстетическая медицина Движение Фитнес Восточные практики Антиэйдж Антивозрастная медицина Секреты долголетия 50+ Еда Здоровое питание Диеты Витамины и добавки Рецепты Эко-жизнь Среда обитания Путешествия Семья Мужской вопрос Тет-а-тет Женское здоровье Дети Люди и истории Секреты селебрити Экспертное мнение Личный опыт

Адрес редакции и издателя: 127015, ГСП-4, г. Москва, Бумажный проезд, 14, стр. 1 Тел. (499)257-41-56 Е-mail: zdorovie@zdr.ru Карта проезда

Реклама на сайте и в журнале

Об ИД Здоровье Распространителям Вакансии Контакты Карта сайта

Наш портал о здоровье, сохранении молодости и здоровом образе жизни. Новости медицины, косметологии, здорового питания от редакции общеизвестного бренда — журнала «Здоровье». У нас вы найдете статьи и блоги о новинках красоты, о диетах, о фитнесе, об уходе за лицом и телом, об anti-age. Вы можете проконсультироваться у специалистов онлайн или найти ответ в нашем проекте «Энциклопедия Здоровья». Электронное периодическое издание «Здоровье» зарегистрировано в Федеральной службе по надзору за соблюдением законодательства в сфере массовых коммуникаций и охране культурного наследия 25 августа 2006 г. Свидетельство о регистрации Эл № ФС77-25469

Заявление об ответственности. Ответственность за содержание рекламных объявлений, в том числе баннеров, размещенных на веб-сайте, несет рекламодатель. Правила использования материалов Любое использование материалов допускается только при соблюдении правил и при наличии гиперссылки на zdr.ru

Если нет достаточных клинических и эпидемиологических данных для предварительного предположения этиологии гепатита, на первом этапе исследуются следующие  серологические маркеры:

  • HAVAb, IgM (острая форма гепатита А)
  • HEVAb, IgM (острая форма гепатита Е)
  • HBsAg, HBcAb (гепатит В)
  • HCVAb (гепатит С)

При положительной реакции на HВsAg и (или) суммарные НВсorAb необходима дальнейшая уточняющая диагностика стадии инфекционного процесса, тестирование:

  • HBcAb, IgM
  • HBsAb
  • HВeAg
  • HBeAb
  • HBV, DNA

Длительная персистенция НВсorAb, при отрицательных тестах HВsAg и  НВsAb может  являться единственным маркером хронической инфекции мутантным штаммом  вируса гепатита В.

Диагностика  ко-инфекции или суперинфекции вирусом гепатита Дельта:

  • HDVAg
  • HDVAb
  • HDVAb, IgM.

При положительной реакции  на HCVAb, необходимо дополнительное исследование:

  • HCVAb, IgM
  • HCVAb белковый спектр в ИФА или иммуноблоте
  • HCV, RNA

Для оценки прогноза развития гепатита С и ответа на интерферонотерапию рекомендуем проводить типирование HCV.

    Диагностические  маркеры вирусных гепатитов и клиническая интерпретация полученных результатов

Маркер

Определение

Клиническая интерпретация

Маркеры  гепатита  А

HAV, RNA RNA вируса гепатита А Обнаруживаются в кале в первые дни после заражения.
HAVAb, IgG/IgM Суммарные антитела против белков вируса гепатита А Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите А
HAVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита А

Маркеры  гепатита E

HЕVAb, IgG/IgM Суммарные антитела против белков вируса гепатита Е Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите Е
HEVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита Е

Маркеры  гепатита В

HBsAg Поверхностный протеин вируса гепатита В Ранний маркер острого гепатита В (появляется через 3-5 недель после заражения), присутствует при хронической, в т.ч. бессимптомной  инфекции
НВsAb Антитела против HBsAg  Перенесенный гепатит В, наличие защитного иммунитета, появляются также после вакцинации
HBcAb Суммарные антитела (IgM и IgG) против  ядерного cor-белка вируса гепатита В (HВcAg в сыворотке  практически не выявляется) Маркер контакта с вирусом и  острая, хроническая или перенесенная инфекция. Важен в диагностике НВs – негативного гепатита. Антитела к НBc не являются защитными
HBcAb, IgM Ранние антитела класса IgM против HBcAg Маркер острой инфекции и продолжающейся репликации вируса
HBeAg Внутренний протеин вируса, кодируется общим с cor-белком геном вируса, но в отличии от HBcAg, HBeAg хорошо растворим и выявляется в сыворотке с момента репликации
HBeAb Антитела против HBeAg
HBV, DNA DNA вируса, прямое определение в ПЦР или реакции молекулярной гибридизации Свидетельствует об активном размножении вируса, и высокой инфекционности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита В. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии

Маркеры  гепатита D (дельта)

HDV, RNA RNA вируса гепатита Дельта Наличие HDV RNA свидетельствует об активности процесса и коррелирует с максимумом воспалительно-некротических изменений в печени и экспрессией HDV RNA в тканях органа. Тест полезен при проведении противовирусной терапии
HDVAg Антиген (специфический белок) вируса  Дельта Маркер  репликации и острой инфекции вирусом Дельта
HDVAb, IgG/IgM Суммарные антитела  против белков вируса гепатита Дельта Маркер контакта с вирусом Дельта (острая или хроническая коинфекция)
HDVAb, IgM Ранние антитела класса М против белков вируса гепатита Дельта Маркер  острой инфекции вирусом Дельта

Маркеры  гепатита С

HСVAb, IgG/IgM Маркер контакта с вирусом C  (острая, хроническая или перенесенная инфекция)
HCVAb, IgM Ранние антитела класса М против белков (core  или  NS 4)  вируса гепатита C Маркер  острой инфекции вирусом гепатита С. Показатель для назначения терапии препаратами интерферона
HCV Western blot подтверждающий Суммарные антитела к отдельным поверхностным и внутренним белкам вируса гепатита С: core, E1, E2, NS3, NS4, NS5 Подтверждающий тест. Дифференциальная диагностика  стадий  инфекции вирусом гепатита С и определение целесообразности терапии препаратами интерферона
Свидетельствует об активной репликации вируса и высокой вирулентности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита С. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии.

Маркеры  гепатита G

HGVAb, IgG Антитела класса против белков вируса гепатита G Острая инфекция или перенесенный гепатит G
HGVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита G Острая инфекция вирусом гепатита G

Рекомендуемый объем  предвакцинального обследования: Перед проведением  вакцинации к вирусу гепатиту В необходимо  провести исследование:

  • HВsAg
  • HВsAb
  • НВсAb

Выявление высокого титра защитных антител: HВsAb свидетельствуют об уже перенесенной инфекции, наличии  устойчивого иммунитета и об отсутствии необходимости в вакцинации. Положительные реакции  на HВsAg, и  НВсAb  свидетельствующие о наличии  инфекции требуют индивидуального решения о целесообразности введения вакцины.

Источник: USAID, Ministerul Sanatatii al Republicii Moldova.  Diagnosticul de laborator al Hepatitelor virale B, C si D. Instructiuni metodice, 2007

В случае отрицательных реакций при выявлении маркеров вирусных гепатитов А, В, С и D следует исключить гепатиты, вызванные вирусами Эпштейна-Барр и цитомегалии:

  • CMV, IgG
  • CMV, IgM
  • EBV Early Antigen, IgG
  • EBV Nuclear Antigen, IgG
  • EBV VCA (капсидный антиген), IgG
  • Epstein Barr Virus VCA (капсидный антиген), IgM

О.А. Тарасенко,  И.А. Гукасян,  Л.В.Соболевская,  Т.В. Черненко

 

Станция переливания крови Департамента Здравоохранения г. Москвы

В настоящее время исследование образцов донорской крови на маркеры вирусных гепатитов В (ВГВ) и С (ВГС) проводят серологическими методами: иммуноферментным (ИФА) или иммунохемилюминисцентным  (ИХЛА) анализом, позволяющими определять  наличие  в   них поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) и антител к белкам ВГС (анти HCV). Введение в лабораторную практику службы крови обязательного тестирования донорской крови на указанные серологические маркеры ВГВ и ВГС  позволило  значительно  снизить риск посттрансфузионной  передачи ВГС и ВГВ.

Известно, однако, что при ВГС специфические антитела появляются в среднем через 10-12 недель от момента заражения, а в некоторых случаях сроки их появления могут отодвигаться до 30-50 недель [2,6]. Поэтому при исследовании методами ИФА или ИХЛА образцов крови, взятой от донора с ранней стадией ВГС, когда антитела еще не выявляются (период, так называемого, серонегативного окна), получают, как правило, ложноотрицательный результат. В то же время именно в этот период ВГС наблюдается, выраженная виремия  и связанная с ней высокая « инфекционная способность» инфицированной крови [3 ]. В связи с этим компоненты крови, заготовленные от донора, находящегося в периоде «серонегативного окна», являются основным источником заражения реципиента ВГС при гемотрансфузии.

Использование NAT-технологий, в частности метода ПЦР, позволяет выявить РНК HCV в крови уже через 1-2 недели после заражения, т.е. приблизительно за 60 дней до выявления в ней антител к HCV серологическими тестами.

HBsAg в большинстве случаев является наиболее значимым серологическим маркером острого и хронического ВГВ, выявление которого в крови свидетельствует с высокой степенью вероятности о присутствии в ней вируса . Однако, зарегистрированы случаи заражения ВГВ при переливании HBsAg-негативной крови. В настоящее время известно о существовании по крайней мере двух «ускользающих (escape)» мутантов HBsAg [9,13], которые могут возникать как естественным путем в ходе инфекционного процесса, так и после противовирусной терапии. Эти штаммы HBV способны передаваться горизонтальным путем и обусловливать ложно негативный результат при скрининге донорской крови на HBsAg. Описана, так называемая, «молчащая» форма ВГВ, характеризующаяся наличием низких концентраций вируса в крови при не детектируемом уровне HBsAg [2, 11]. Она может наблюдаться у некоторых больных после острого ВГВ с самостоятельным разрешением и даже после успешно проведенного противовирусного лечения, а также при хроническом ВГВ. Установлено, что «молчащая» инфекция представляет клиническую форму ВГВ, способную передаваться через компоненты крови, а диагностика ее основывается на тщательном сборе анамнеза и применении высокочувствительного метода ПЦР для определения вирусной ДНК [1].

Задачей настоящей работы было оценить целесообразность использования метода ПЦР для скрининга донорской крови на маркеры ВГС ВГВ.

Пробы крови от каждого донора забирали в 2 пробирки: одну пробирку с разделительным  гелем для получения сыворотки для серологических исследований и вторую пробирку с ЭДТА для получения плазмы для ПЦР.

Скрининг донорских сывороток на серологические маркеры ВИЧ 1,2, ВГВ и ВГС проводили методом ИФА на аппарате Evolis (компания Biorad, США) или методом ИХЛА на аппарате Architect (компания Abott, США).

Для определения антител к HCV методами ИФА и ИХЛА использовали, соответственно, тест-системы Murex anti HCV (Abbott, США) и    тест-системы Architect anti HCV (компания Abbott, США).

Для выявления HBsAg методом ИФА использовали тест-системы Monolisa HBsAg Ultra  (Bio-Rad, США) и тест-системы Architect HBsAg (компания Abbott, США).

Образцы, показавшие при первичном исследовании в ИФА или ИХЛА положительный результат на анти ВИЧ 1,2, анти HCV или HBsAg, отбирали для повторного исследования в тех же тест-системах и подтверждающих тестах.

Все серонегативные образцы исследовали методом ПЦР на наличие РНК HIV, HCV и ДНК HBV.

В течение 2008 года ПЦР-исследования проводили на аппаратах Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor ( компания Roch, Швейцария) с использованием тест-систем: Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor HIV 1 Monitor Test , Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor HCV Test и Cobas Amplicor HBV Monitor Test.

С января 2009 года исследования выполняли методом ПЦР в режиме реального времени на инструментальном комплексе Cobas 201 (Roche. Швейцария), включающем пипетирующую рабочую станцию, аппарат для автоматического выделения нуклеиновых кислот Cobas Ampliprep и анализатор Cobas Taqman для автоматического проведения амплификации и детектирования нуклеиновых кислот с использованием 5 нуклеазной технологии. Многоканальные оптические системы прибора позволяют регистрировать флуоресцентный сигнал от исследуемого образца в каждом цикле ПЦР. Для ПЦР-анализа серонегативных образцов использовали мультиплексные тест-системы CobasTaqScreen MPX Test, разработанные компанией Roche специально для скрининга донорской крови [10]. За счет включения в реакционную смесь различных пар специфических праймеров и зондов эти системы позволяют выявлять одновременно в одной пробирке РНК HIV-1 rpyппы М и группы О, HIV-2, HCV и ДНК HBV. Образцы, при исследовании которых регистрировали нарастание флуоресцентного сигнала, считали положительными, т.е. содержащими вирусную РНК (ДНК). Такие образцы исследовали повторно в той же тест-системе. При получении повторно положительного результата проводили идентификацию выявленной нуклеиновой кислоты с помощью указанных выше ПЦР-диагностикумов на отдельные инфекции.

Результаты исследования представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1 — Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом   ПЦР на комплексе Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor           

Количество исследований

Количество образцов, содержащих:

PHKHCV

РНК HIV

ДНК HBV

56 983

8

Таблица 2 — Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом  ПЦР на комплексе Cobas S 201                    

Количество исследований

Количество положительных результатов     в тесте МРХ

Количество положительных результатов в дискриминаторном тесте на:

РНК HCV

РНК HIV

ДНК HBV

62 438

31

16

4

При исследовании 56983 серонегативных образцов донорской плазмы на наличие вирусной РНК (ДНК) на аппаратах Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor с помощью диагностических тест-систем на отдельные иифекции (табл.1) было выявлено 8 образцов, содержащих РНК HCV. При этом РНК HIV-1 и ДНК HBV ни в одном из исследованных образцов выявлено не было.

При исследовании 62438 серонегативных образцов на аппаратном комплексе Cobas 201 с помощью тест-систем CobasTagScreen МРХ в 31 случае было зарегистрировано нарастание флуоресцентного сигнала, свидетельствующее о наличии в образце вирусной РНК (ДНК) (табл.2). Дискриминаторный анализ этих образцов с помощью тест- систем на отдельные инфекции  выявил в 16-и из них РНК HCV, в 4-х. других- ДНК HBV   в низкой концентрации (менее 60 IU./ml). Остальные 11 образцов, положительные в тесте CobasTagScreen МРХ, показали отрицательный результат в индивидуальных тестах на РНК HIV-1, РНК HCV и ДНК HBV. Однако при исследовании образцов, содержащих ДНК HBV и образцов с не идентифицированной нуклеиновой кислотой на наличие антиНВсоr во всех случаях выявили выраженную серологическую реакцию (коэффициент позитивности колебался от 7,8 до 8,6) (табл.3).

Таблица 3 — Выявление ДНК HBV у серонегативных доноров

№ п/п

Результат скринингового теста

Результат ПЦР-теста на ДНК HBV

Наличие Anti НВсог

Наличие Anti HBs

1

+

+

2

+

+

+

3

+

+

4

+

+

+

5

+

+

+

6

+

+

  

7

+

+

8

+

+

+

9

+

+

+

10

+

+

11

+

+

+

_

12

+

+

+

13

+

+

14

+

+

+

15

+

В 4-х образцах были также обнаружены антитела к HBsAg . Наличие в образцах с не идентифицированной нуклеиновой кислотой серологических маркеров HBV инфекции позволяет считать, что в них присутствует ДНК HBV в концентрации ниже предела чувствительности теста Cobas Amplicor HBV Monitor (40 IU/ml), выявляемая, однако, более чувствительной тест-системой CobasTagScreen MPX (3,3-4,4 IU/ml).

Обобщая полученные результаты, мы установили, что методом ПЦР из 119421 образцов донорской плазмы, показавших отрицательный результат в серологических тестах, выявлено 24 образца (0,02%), содержащих РНК HCV.  16 HCV -позитивных образцов имели нормальный уровень трансаминаз, в то время как в 8-и других был зарегистрирован повышенный уровень активности АЛТ. Подобная картина может наблюдаться как  при ранней инфекции (период серонегативного окна), так и при хроническом ВГС у лиц с подавленным иммунитетом. Данные литературы, свидетельствующие об отсутствии прямой зависимости между уровнем АЛТ и наличием РНК HCV в сыворотке крови [4] позволяют считать, что обнаружение РНК HCV в крови является наиболее информативным показателем HCV-инфекции в период серонегативного окна.

Также нами было выявлено 11 случаев ВГВ у HBsAg негативных доноров. В 4-х из них низкий уровень виремии сохранялся несмотря на наличие анти- HBS. Известно, что подобное состояние иногда может наблюдаться длительное время после клинического выздоровления от острого ВГВ. Предполагают, что персистенция вируса в этом: случае может осуществляться в форме иммунного комплекса с анти-HBs [11]. В остальных случаях сочетание низкого уровня виремии с наличием только анти-НВсог скорее укладывается в картину «молчащей» формы хронического ГВ. Считают, что отрицательные результаты при детекции HBsAg у больных ВГВ могут быть вызваны низким уровнем HBsAg, образованием иммунных комплексов, а также мутациями вируса в S-регионе [11,17]. Механизмы, поддерживающие низкий уровень репликации вируса при «молчащей» форме ГВ нуждаются в дальнейшем изучении. В настоящее время к факторам, способным поддерживать персистенцию вируса в крови при «молчащей» HBV- инфекции относят инфицирование вирусом моноцитов крови, формирование иммунных комплексов с антителами, ослабленный иммунитет и коинфекцию [11,17].

Таким образом, на основании полученных результатов можно заключить, что скрининг образцов донорской крови с применением ПЦР-тестирования для выявления вирусной РНК (ДНК) позволит снизить риск посттрансфузионной передачи вирусных гепатитов В и С, за счет выявления инфицированных доноров, находящихся в периоде серонегативного окна и доноров с молчащей формой инфекции. Алгоритм апробации донорской крови, при котором скрининг образцов методом ПЦР проводят одновременно с исследованием их в серологических тестах, позволит не только повысить инфекционную безопасность гемопродукции, но и сократить промежуток времени    от момента забора крови до выдачи ее в лечебные    учреждения,  что особенно  важно    для   сохранения компонентов с ограниченным сроком годности.

ЛИТЕРАТУРА

1.    Амосов А.Д. Гепатит В (издание 2).  Кольцов, 2001.- 128 с.

2.    Голосова Т..В., Никитин И.К. Гемотрансмиссивные инфекции.- М.., 2003.- 191 с.

3.    Карякин А.В., Скоцеляс Е.Д., Терентьева Л.А. Мониторинг безопасности донорского контингента России//Трансфузиология, 2007.- №1-2.- с.21.

4.    Майер К.П. Острый вирусный гепатит С.// В кн.: Гепатит и последствия гепатита. /Пер. с нем.- М.: ГЭОТАР Медицина,. 1999.- с.91-98.

5.    Малышев B.C., Федорова В.Д., Потехин О.Е. Маркеры вирусного                               гепатита В у доноров крови и в группах сравнения // Иммунопатология, аллергология, инфектология.-1999.- №1.- с.103-105.

6.    Рагимов А.А., Дашкова Н.Г. Основы трансфузионной иммунологии. — М., 2004.-280 с.

7.    Allain J.P. Occult hepatitis В virus infection: implication in transfusion. // Vox Sang., 2004, Vol.86, N.2, p.83-91.

8.    Busch M.P., Glynn S.A.. Strainer S.L. et al. A new strategy for estimating risk of transfusion-transmitted viral infections based on rates of detection of resently infected donors.// Transfusion, 2004, vol. 45, p.254-264.

9.    Gutierrez C, Devesa M., Loureiro C.L. et al. Molecular and serological evaluation of surface antigen negative hepatitis В virus infection in blood from Venezuela. // J.Med.Virol., 2004, Vol. 3, N.2 p.200-207.

10. Herman S., Ohhashi Y., Kyger E. et al. Performance characteristics of a new multiplex NAT screening test for HBV, HCV and HIV. The Cobas TagScreen MRX Test on the COBAS S 201 system.// Vox Sang., 2007, Vol.91, Suppl.3:81.

11. Ke-Qin Hu. Occult hepatitis В virus infection and its clinical implications. // Journal of viral hepatitis, 2002, Vol.9, p.243-257.

12. Kleinman SH., Strong DM., Tegtmeier GE. Et.al. Hepatitis В virus (DBV) DNA screening of blood donation in minipools with the Cobas AnipliScreen HBV test. // Transfusion, 2005.VoI.45, p.1247-1257.

13. Levicnik.-Stezinar S. Hepatitis В surface antigen escape mutant in a first blood donor potentially missed by a routine screening assay. // Clin.Lab.< 2004, Vol.50, N.l-2, p.49-51.

14. Minegishi K., Yoshikawa A., Kishimoto S. et al. Superiority of minipool nucleic acid amplifycation technology for hepatitis В virus over chemiluminescence immimoassay for hepatitis В surface antigen screening. Vox Sang., 2003, Vol.84, p.287-291.

15. Roth W.K., Weber M., Petersen D. et al. NAT for HBV and anti HBc testing increase blood safety. // Transition, 2002, Vol.42, p.869-875.

16. Stramer S.L., Glynn S.A., Kleinman S.H. et al. Detection of HTV-1 and HCV infections among antibody-negative blood donors by nucleic acid- amplification testing.// N Engl Med, 2004, vol.351, p.760-768.

17. Weber В., Melchior W., Gehrke R. et al. Hepatitis В virus markers in anti-ITBc only positive individuals. III. Med. Virol., 2001, Vol.64, N.3, p.312-3 19.

18. Yoshikawa A, Gotanda Y., Itabashi M. et al. Hepatitis В NAT virus-poselive blood donors in the esrly and late stages of HBV infection: analyses of the window period and kmetics of HBV DNA. Vox Sang.,2005, Vol.88, p.77-86.

19. Голосова Т.В., Никитин И.К. Гемотрансмиссивные инфекции. — М.,2003.

Все статьи в разделе «Лабораторная диагностика»

Оцените статью
Рейтинг автора
4,8
Материал подготовила
Татьяна Лапшаева
Нефролог, врач высшей категории, стаж более 20 лет
А как считаете Вы?
Напишите в комментариях, что вы думаете – согласны
ли со статьей или есть что добавить?
Добавить комментарий